【摘 要】
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目的 研究渥曼青霉素(wortmannin,WM)对恶性胶质瘤的辐射增敏作用及机制.方法 采用10 μmol/L WM预处理人胶质瘤细胞U251 2 h,并给予10 Gy X射线照射,检测细胞周期及凋亡的变化；通过Western blot和免疫荧光染色方法检测蛋白共剂失调-毛细血管扩张症突变基因(ATM)及其靶基因,以及DNA依赖蛋白激酶的催化亚单位(DNA-PKcs)的表达和功能的变化.结果 W
【机 构】
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130021长春,吉林大学白求恩第一医院放疗科,吉林大学病理生物学教育部重点实验室,130021长春,吉林大学白求恩第一医院放疗科,130021长春,吉林大学白求恩第一医院放疗科,130021长春,吉
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目的 研究渥曼青霉素(wortmannin,WM)对恶性胶质瘤的辐射增敏作用及机制.方法 采用10 μmol/L WM预处理人胶质瘤细胞U251 2 h,并给予10 Gy X射线照射,检测细胞周期及凋亡的变化；通过Western blot和免疫荧光染色方法检测蛋白共剂失调-毛细血管扩张症突变基因(ATM)及其靶基因,以及DNA依赖蛋白激酶的催化亚单位(DNA-PKcs)的表达和功能的变化.结果 WM预处理联合X射线照射(WM+ IR)组,U251细胞的凋亡率由对照组和IR组的(5.3±0.66)％和(11.5±2.0)％增高到(21.8±2.4)％,各组间差异具有统计学意义(F=57.38,P＜0.05).在IR组和WM+ IR组中,伴随着凋亡率的增加,凋亡基因cleaved caspase-3的表达明显高于对照组(q=12.49、19.19,P＜0.05),且WM+ IR组较IR组增高更为明显(q =6.70,P＜0.05).与对照组比较,细胞周期检测IR组G2/M期细胞明显增多(q =9.67,P＜0.05),WM+ IR组进一步增加(q =21.25,P＜0.05),出现明显的G2/M期阻滞.同时,WM有效抑制了X射线诱导的ATM蛋白激酶的磷酸化及其下游基因p53和SMC1的活化,并且抑制射线诱导的DNA-PKcs表达,而增加了DSB标记物phospho-γ-H2A.X(Ser139)的表达.结论 WM通过下调ATM激酶和DNA-PK蛋白的活性来增强恶性胶质瘤细胞的辐射敏感性。
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