【摘 要】
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以经过改造的烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体PYL156为工具,采用叶片注射法侵染茄子(Solanum melongena L.)叶片,通过表型比较、TRV病毒分子检测和荧光定量PCR技
【机 构】
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中国农业科学院蔬菜花卉研究所; 重庆市农业科学院蔬菜花卉研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31572122);中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-IVFCAAS);农业部中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610102016025);农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目;重庆市院士引导专项(cstc2017jcyj-yszx X0005)
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以经过改造的烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体PYL156为工具,采用叶片注射法侵染茄子(Solanum melongena L.)叶片,通过表型比较、TRV病毒分子检测和荧光定量PCR技术分析,探究环境温度、植株大小、目的基因插入片段大小对茄子TRV-VIGS沉默体系的影响。结果表明,昼夜温度为(25±3)℃和(20±2)℃时,接种茄子幼苗子叶的植株沉默效果明显,侵染后植株叶片中目的基因表达量与阴性对照相比明显降低;早春日光温室和秋季日光温室条件下,侵染植株表型性状和基因表达量差异不显著。沉默片段大小为200 bp左右时目的基因的沉默效果最好;侵染茄子幼苗子叶期植株出现明显病毒斑,而接种6周龄真叶则无明显表型差异。用茄子生长素诱导基因(SmIAA19)为靶基因对其进行验证,结果表明显著抑制了SmIAA19的表达,其在叶片中的表达量和生长素含量均显著降低,表明Sm IAA19是1个与生长素代谢途径相关的基因。
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