【摘 要】
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为制备抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体（MAb）,本研究从鸡白痢沙门菌（CVCC526）基因组中扩增菌毛蛋白基因peg A,将其克隆至原核表达载体pET-22b（＋）中构建重组质粒pET-peg A,转化至大肠杆菌B
【机 构】
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扬州大学兽医学院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,上海出入境检验检疫局虹口办事处,广西园丰牧业集团股份有限公司,江苏省家禽科学研究所
【基金项目】
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科技部畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发重点专项（2017YFD0500105,2016YFD0500905）,江苏高校优势学科建设工程资助项目
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为制备抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体（MAb）,本研究从鸡白痢沙门菌（CVCC526）基因组中扩增菌毛蛋白基因peg A,将其克隆至原核表达载体pET-22b（＋）中构建重组质粒pET-peg A,转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白rPegA。应用该蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选后获得1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株,命名为3D12,抗体亚类鉴定其属于IgG1亚类,腹水效价为1∶64 000。通过western bl
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