【摘 要】
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目的:体外分离、培养乳腺肿瘤干细胞,并鉴定其生物学特性。方法:收集临床术后乳腺癌患者的肿瘤组织,经机械剪切联合酶消化法获得肿瘤细胞并培养,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原,
【机 构】
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宁夏医科大学总医院干细胞研究所,宁夏医科大学生育力保持省部共建重点实验室,宁夏医科大学检验学院,宁夏医科大学总医院肿瘤外科,
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目的:体外分离、培养乳腺肿瘤干细胞,并鉴定其生物学特性。方法:收集临床术后乳腺癌患者的肿瘤组织,经机械剪切联合酶消化法获得肿瘤细胞并培养,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原,MTT比色法检测细胞生长曲线,实时定量PCR(qPCR)鉴定细胞Sox2、Nanog等基因表达,免疫荧光检测细胞特异性蛋白Bcl-2、孕激素受体(PR)的表达。结果:所获得的细胞呈克隆球样形态生长,鉴定结果发现其具有CD44+/CD24-表型,该细胞高表达Sox2、Nanog基因,且Bcl-2、PR蛋白均阳性表达。结论:人乳腺肿瘤组织中存在具有自我更新和增殖能力、表达CD44+/CD24-的乳腺肿瘤干细胞,并能在体外长期培养。
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