观察肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）损伤中膜突蛋白（Moesin）磷酸化水平的变化，探讨Rac1信号通路对Moesin磷酸化的影响。
方法体外培养大鼠PMVECs并传至第3代，分别进行TNF-α时效实验、量效实验以及Rac1信号通路干预实验。① 时效实验：以10 μg/L TNF-α分别刺激大鼠PMVECs 0、15、30 min和1、3、6、12 h后，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测Moesin和磷酸化Moesin （p-Moesin）的蛋白表达。② 量效实验：分别以0、0.1、1、10 μg/L TNF-α刺激大鼠PMVECs 6 h后，采用Western Blot检测Moesin和p-Moesin的蛋白表达。③ Rac1信号通路干预实验：在PMVECs细胞中分别给予3 mL 200 μmol/L的Rac1特异性抑制剂NSC23766预孵0.5 h或200 μmol/L的Rac1特异性激动剂O-Me-cAMP预孵1 h，再分别与10 μg/L的TNF-α共孵育6 h；同时设立空白对照组及O-Me-cAMP、NSC23766、TNF-α单独处理组；采用Western Blot检测Moesin和p-Moesin的蛋白表达。
结果① 时效实验结果：以10 μg/L TNF-α与大鼠PMVECs共孵育后各时间点Moesin表达量无明显变化；而TNF-α诱导15 min时，p-Moesin表达量即较0 min迅速升高（p-Moesin/Moesin：4.399±0.523比1.000±0.195），30 min达高峰（6.069±0.557），1 h后逐渐下降（1、3、6、12 h分别为5.005±0.544、4.599±0.478、1.742±0.288、1.503±0.352），各时间点间差异有统计学意义（F=15.397，P=0.002）。② 量效实验结果：各剂量TNF-α与大鼠PMVECs共孵育6 h时Moesin表达量无明显变化；而以0.1 μg/L TNF-α诱导的p-Moesin表达量即较0 μg/L显著升高（p-Moesin/Moesin：2.194±0.430比1.000±0.273），且随TNF-α剂量增加呈持续升高趋势（1 μg/L和10 μg/L分别为3.201±0.688、4.413±0.296），各剂量组间差异有统计学意义（F=92.513，P<0.001）。③ Rac1信号通路干预实验结果：各组间Moesin表达量无明显差异。与空白对照组比较，Rac1特异性激动剂O-Me-cAMP或Rac1特异性抑制剂NSC23766单独刺激均不能改变p-Moesin表达；而TNF-α可诱导p-Moesin表达。与TNF-α组比较，NSC23766可显著上调TNF-α诱导的p-Moesin表达（p-Moesin/Moesin：2.612±0.355比1.911±0.297，P<0.05）；而O-Me-cAMP则呈现显著下调作用（p-Moesin/Moesin：1.928±0.331比3.030±0.353，P<0.05）。
结论Moesin的磷酸化参与了TNF-α诱导的大鼠PMVECs损伤；通过调控Rac1信号通路中的Moesin磷酸化表达可以减轻PMVECs损伤。