【摘 要】
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目的了解脐血造血干细胞在体外扩增培养过程中的生长分化特点,探讨脐血干细胞与体外扩增后的祖细胞混合移植的可行性以及合适的移植时机.方法接种脐血单个核细胞(MNC)于含体
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目的了解脐血造血干细胞在体外扩增培养过程中的生长分化特点,探讨脐血干细胞与体外扩增后的祖细胞混合移植的可行性以及合适的移植时机.方法接种脐血单个核细胞(MNC)于含体积浓度为20%胎牛血清(FCS)的IMDM悬浮培养体系中,加入干细胞因子(SCF)、Flt-3配基(FL)、粒-单细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6),培养21d,每周半量换液,同时进行细胞计数,涂片形态学观察,粒-单系祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(BFU-E)集落培养,细胞表面CD34+、CD33+、CD3+、CD19+标记和细胞增殖周期的动态观察.结果培养7d时的脐血细胞,CFU-GM、BFU-E集落形成最多,之后逐渐减少,21d时已低于培养前水平.CD34+细胞比例在培养后7d达高峰,14d时开始下降;CD33+细胞比例在培养后7～14d达高峰,21d时开始下降;CD3+、CD19+细胞比例均在培养第7d时显著下降,并持续低水平至21d.培养7d后G0期细胞比例明显减少,S期细胞快速增高,至21d时仍有较高比例.培养第21d的细胞涂片见少量中、晚幼粒细胞. 结论理论上脐血干细胞与扩增后的祖细胞混合移植用于成人具有可行性,体外扩增培养7d左右是混合移植的最佳时机.
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