心血管疾病患者与胆固醇酯转运蛋白及某些基因缺陷

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  心血管疾病患者与胆固醇酯转运蛋白及某些基因缺陷
  
  
  王亚霞 边 才 付立国 李晓丹
  
  
  (牡丹江林业中心医院 黑龙江 牡丹江 157011)
  摘要:伴随着我国医疗事业的发展,我国对于心血管疾病的研究逐渐深入,本研究将针对心脑血管疾病患者与胆固醇酯转运蛋白及某些基因缺陷进行探究,希望能够为患有心脑疾病患者的治疗带来一定的借鉴意义。
   关键词:心血管疾病;胆固醇酯转运;基因缺陷 【中图分类号】R543 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602(2014)03-0118-01
  1 实验对象
   笔者统计了某院心肌梗死(MIS)94例、脑卒中组110例和健康组335名,均为男性,年龄45~73岁,平均年龄分别为60.1岁、58.5岁和59.2岁。健康人选自健康体检者,包括临床、心电图和实验室检查正常。MIS和脑卒中组均为住院患者,MIS由典型的症状、心电图和实验室检查证实。脑卒中诊断根据症状、神经系统和CT检查,参加本研究的患者均处于恢复期。血液标本采自禁食12 h以上,2h内分离血清,-70℃保存,CETP基因检查用EDTA抗凝(1 mg/ml)。
   2 实验方法
   2.1 血清总胆固醇(TC)、TG、HDL-C测定:采用BM公司试剂盒及相应公式计算免疫比浊试剂,用上海明华公司试剂盒,以五点定标非线性标准曲线计算结果,校准血清用本室WHO-IFCC国际参考材料靶值转移后的定值血清标定,校准血清用定值血清标定,测定仪器用日立7150生化自动分析仪。
   2.2 CETP活性测定:人工合成14C-胆固醇酯标记的含apoAI的双盘状、双层颗粒(DBP)模拟HDL,作为胆固醇酯的供体,人血清LDL(超速离心d1.020~1.045 kg/L)作为受体,2-硝基苯甲酸抑制卵磷酯胆固醇酰转移酶活性。被检血清与DBP孵育后加入DS(分子量500 000)、MgCl2沉淀LDL后溶于0.1 mol/L NaOH中,测定14C的DPM值,活性以DBP转移到LDL中放射活性的百分率表示。
   2.3 统计学方法:数据以均数±标准差( x±s)表示,数据处理采用t检验、卡方检验和相关性分析,非正态分布的CETP和Lp(a)经对数转换后统计分析。
  3 实验结果与讨论
   3.1 实验结果:心梗组、脑卒中组和对照组CETP和血脂测定结果:心梗组、脑卒中组与对照组比较,血清CETP浓度升高,HDL-C、载脂蛋白AI(apoAI)下降,TC、LDL-C、ApoB脂蛋白(a)[Lp(a)]升高。CETP基因突变者和健康人的CETP浓度与各项血脂测定结果之间均无相关性。心脑血管疾病患者和正常人CETP基因突变频率:根据酶切PCR产物的PAGE图谱判断CETP基因突变,心脑血管疾病患者和健康人CETP基因突变结果示心脑血管疾病患者二种CETP基因突变频率与健康人差异无显著意义(x2=1.6,P>0.05)。CETP基因缺陷患者CETP浓度、活性和血脂测定结果:15例CETP基因缺陷者CETP浓度、活性和HDL-C较非基因缺陷者显著降低。
   3.2 结果讨论: MIS和脑卒中患者血清CETP显著高于健康人,同时患者呈现As脂蛋白谱改变,包括HDL-C、apoAI降低和LDL-C、apoB和Lp(a)升高,胆固醇从抗As脂蛋白重新分布到致As脂蛋白,但是本组病例并没有发现CETP水平与各种脂蛋白之间存在因果关系。CETP与As的关系十分复杂,CETP对As总体的影响可能取决于机体的代谢状态,如果胆固醇逆向转运途径的其他因素功能正常,CETP的主要作用有利于抗As;而在多種异常脂蛋白血症(异常β脂蛋白血症,家族性高胆固醇血症和混合型高脂蛋白血症)和一些疾病(糖尿病、肾病综合征和As性心脑血管疾病),CETP过度表达导致As脂蛋白谱,使胆固醇逆向转运途径发生障碍和促进As形成。中国人D442G和I14A的频率与日本人相近(日本人D442G 4%~6%,I14A 0.5%~1.0%,两者共计5%~7%)。对照非CETP基因突变者,CETP基因突变者血清CETP浓度和活性降低(P<0.01),HDL-C均值明显升高(P<0.01)。特别引人注目的是CETP基因突变杂合子的中国人,HDL-C≥80 mg/dl(2.07 mmol/L)的频率比杂合子日本人少得多。中国北京居民D442G的频率为4.2%,但基因突变者不伴有HDL-C升高,可能中国人CETP基因突变者的脂蛋白异常特征和对心脑血管疾病的影响与日本人有所差别。本研究的MIS和脑卒中患者CETP基因突变频率不高于健康人,而大多数日本较大的人群调查发现CETP突变者CHD危险性增高,可能我们观察的人数相对较少。结果为高HDL-C人群中CETP基因突变者与非基因突变者CHD发病率没有差异。虽然流行病学调查存在不同的结果,但一些研究指出,CETP缺陷者有HDL、VLDL、LDL等质和量的改变和脂蛋白代谢异常。例如CETP缺陷者血清中大的和富含胆固醇的HDL颗粒抑制巨噬细胞乙酰LDL致胆固醇酯积蓄能力下降,使周围细胞胆固醇流出减少;胆固醇酯含量下降,甘油三酯增加的VLDL、LDL与LDL受体亲和力降低,在循环中清除速度减慢;CETP降低同时伴肝酯酶活性降低致富含甘油三酯的HDL堆积,阻滞CRT等,以上结果一方面说明CETP缺陷者CETP降低、HDL-C升高等与心脑血管疾病患者有截然不同的特点,另外亦解释了CETP缺陷者脂蛋白组成和功能异常可能是高发心脑血管疾病的原因。
  4 结语
   综上所述,As作为十分复杂的病理过程涉及环境和遗传两种因素的综合影响,因此需要更多的临床和基础研究才能进一步评价CETP基因缺陷与As的关系。
  参考文献
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