内脏脂肪素对巨噬细胞MMP-9的作用及其机制探讨

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jyy3196294
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目的研究内脏脂肪素(visfatin)对巨噬细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的作用及其机制。方法体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞。为明确visfatin对MMP-9的作用,细胞分为两组:①巨噬细胞+visfatin12h组;②巨噬细胞+visfatin24h组,两组的visfatin的质量浓度均为:0(对照组)、50、100、200、400ng/mL。采用RT-PCR和Westernblotting测定MMP-9基因和蛋白表达,明胶酶谱法检测MMP-9的活性。为明确visfatin对MMP-9的作用机制,细胞分为五组:①巨噬细胞未加刺激组(对照组);②巨噬细胞+MAPKp38、ERK1/2、JNK信号通路抑制剂预处理1h后加visfatin(200ng/mL)24h组;③巨噬细胞+过氧化物酶体增殖剂活化受体(PPARγ)天然及人工配体/RXR配体预处理1h后加visfatin(200ng/mL)24h组;④巨噬细胞+visfatin(200ng/mL)24h组(Vis200组);⑤巨噬细胞+visfatin(200ng/mL)刺激不同时间组(5、10、15、30、60min)。Western blotting检测MMP-9蛋白和PPARγ蛋白表达及visfatin刺激下巨噬细胞p38、ERK1/2、JNKMAPK磷酸化水平。结果Visfatin能促进MMP-9基因及蛋白表达(P<0.05,P<0.01),同时增强了MMP-9的活性(P<0.01)。p38MAPK、ERK1/2MAPK通路抑制剂及RXR配体抑制visfatin对MMP-9表达具有上调作用;visfatin能促进p38MAPK和ERK1/2MAPK的磷酸化,但不影响PPARγ蛋白的表达。结论Visfatin增加了巨噬细胞炎症因子的表达,该作用与p38MAPK和ERK1/2MAPK信号通路有关;RXR可能参与了该过程。
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