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【摘要】本实验以毒芹碱具有杀虫作用为机理，通过对毒芹根进行不同提取获得初提取物A、B、C配制300倍和600倍来毒杀巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫及蚜虫。得到毒芹碱属于急性药物，对害虫以内吸作用为主，不同提取方法毒芹碱含量不同，其中初提取物以95%乙醇提取3.5h为佳，效果浓度以300倍稀释液对杀虫效果最好，且对菜青虫的拒食有一定影响。
【关键词】毒芹；初提取物；杀虫效果
【中图分类号】TQ453【文献标识码】A
【文章编号】1007-4309（2010）12-0071-3
我国植物源杀虫剂的发展具有悠久的历史。植物源杀虫剂除具有与有机合成杀虫剂相同的作用方式（触杀、胃毒、熏蒸）外，还具有拒食、抑制生长发育、忌避忌产卵、麻醉、抑制种群形成等特异的作用方式。目前已有苦参碱水剂、烟碱乳油、楝素乳油、鱼藤酮乳油等开发成功，取得登记生产。开发植物源农药是现代农药研究的一个重要发展方向。
毒芹（cicuta virosa L．）是伞形科的多年生有毒草本植物，主要分布在我国北方地区。植株高大，最高可达1m以上，基生叶，茎杆中空，折断后有刺激性气味。外型酷似芹菜；叶为2-3或4回羽状复叶，羽片边缘有锯齿；基生叶及茎下部的叶有长柄，叶片羽状分裂，基部扩展成鞘状；复伞形花序，花白色顶生；双悬果卵球形，有黄色粗棱；花期7-8月，果期8-9月。喜在河边、沟旁、沼泽地、沼泽草甸和林缘草甸生长。全草有毒，但根茎含毒性物质最丰富。在水中或水边生长的毒芹须根系发达，主根不发达，在相对干的土壤中则主根发达且明显肉质化。其中能引起运动神经末端麻痹的主要有毒成分是毒芹碱（coniine），其次是毒芹侧碱（coniceine））、甲基毒芹碱（N-methylconiine）、羟基毒芹碱（conhydrine）、伪羟基毒芹碱（pseudoconhydrine）等甾类生物碱。
由于关于毒芹碱杀虫活性的研究在国内外很少，对深入研究毒芹具有重要价值。本实验采用300倍和600倍两种浓度对三种初提取物进行稀释，通过毒杀巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫及蚜虫，进行数据方差分析。
一、材料与方法
（一）试验材料
采自吉林市昌邑区左家镇育才桥旁苗圃园中的毒芹，选取毒芹根茎为试验品；供试害虫为巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫、蚜虫。
（二）仪器
索式提取器、连续回流提取器、渗滤装置、电热套、水浴锅、8层纱布、分析天平、烧杯、容量瓶、培养皿、解剖针、喷壶、镊子。
（三）试剂
95%乙醇、蒸馏水、5%碳酸钠。
（四）试验方法
1．试液提取
用分析天平3次称量毒芹饮片5g，误差在0.1以内。溶液A为95%乙醇溶液100V的电热套100℃加热，提取3.5h，所得到的初提取物。溶液B为95%乙醇溶液水浴90℃加热，提取3h，所得初提取物。溶液C为先用5%的碳酸钠溶液浸泡3h，再加入95%乙醇90℃提取3h，所得初提取物。
采用乙醇浸提的方法，经减压蒸馏获得粗初提物，所得不同种类的实验药剂见表1。
表1各种初提取物浓度及其在实验中的处理号
（注：其中A、B、C均为毒芹的根茎，1代表初提取物300倍处理，2代表初提取物600倍处理。表中前面數字为实验中的药剂处理号，A为95%乙醇提取3.5h得初提取物，B为95%乙醇提取3h所得初提取物，C为5%的碳酸钠溶液浸泡3h后用95%乙醇提取所得初提取物。）
2．杀虫实验设计
各组试验均设置四次重复。药剂处理后24h、48h、72h调查试虫死亡情况，计算死亡率及校正死亡率。以肉眼直接观察，检查死活虫数，中毒后的害虫，经解剖针轻轻触动，肢体能动但不能爬行，仰翻或完全不动，视为死亡。
巢蛾幼虫、舞毒蛾采用直接虫体喷洒法。
校正死亡率%=×100
菜青虫采用非选择性拒食率的测定方法。
拒食率%=×100%
蚜虫试验采用叶片喷雾喂食法，计算死亡率及校正死亡率。
二、结果与分析
（一）毒芹初提取物对巢蛾幼虫杀虫效果的试验
图1毒芹初提取物对巢蛾幼虫杀虫效果
表2处理后巢蛾幼虫死亡率的统计
由图1和表2对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对巢蛾幼虫48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，效果不显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较；效果不显著；C1与C2相比较，C1显著。在相同条件下杀虫，A与B比较，A显著；A与C比较，A显著；B与C比较，B显著。可知毒芹初提取物对巢蛾幼虫具有杀虫效果，且300倍效果要好于600倍。
（二）毒芹初提取物对舞毒蛾杀虫效果的试验
由图2和表3对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对舞毒蛾48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，A2效果显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较，B2效果显著；C1与C2相比较，C1显著。可知，在相同条件下毒芹初提取物对舞毒蛾的作用，A效果显著，B次之，C最弱。
（三）毒芹初提取物对菜青虫拒食活性的试验
由图3和表4进行方差分析得到，初提取物A、B、C对菜青虫48h后拒食活性效果，A1与A2比较，无明显差异；A2与B1比较，无明显差异；B1与B2比较，B1效果显著；B2与C1比较，B2效果显著，C2基本对菜青虫拒食无影响。A1、A2、B1三者对菜青虫拒食都有明显效果。
（四）毒芹初提取物对蚜虫杀虫效果的试验
由图4和表5对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对蚜虫48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，A2显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较，B2显著；C1与C2相比较，C1显著。可知，在相同条件下对蚜虫的作用，A显著，B次之，C最弱。
三、结论
本实验以毒芹碱具有杀虫作用为机理，通过对毒芹根进行不同提取获得初提取物A、B、C配制300倍和600倍来毒杀巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫及蚜虫。得到毒芹碱属于急性药物，对害虫毒杀以内吸作用为主，不同提取方法毒芹碱含量不同，其中初提取物以95%乙醇提取3.5h为佳，浓度以300倍稀释液对杀虫效果最好，且对菜青虫的拒食有一定影响。该试验为植物源农药的开发利用提供了一定的物质基础。
【参考文献】
［1］何康等主编．中国农业百科全书·农药卷［M］．北京：农业出版社，1993．
［2］赵善欢，张兴．植物性物质川楝素的研究概况［J］．华南农业大学学报，1987，8（2）：57-67．
［3］江苏新医学院编．中药大词典（上册）［M］．上海：上海人民出版社，1997，1499．
［4］施大钊，郭喜红，李安陆．毒芹生物碱的提取及对害鼠的毒性试验［J］．植物保护与推广，2002，22（6）：27-29．
［5］胡美英，徐汉虹．羊角扭对菜粉蝶幼虫的生物活性及药效的研究［J］．华南农业大学学报，2000，21（1）．
［6］童红云，赵善欢．雷公藤对菜青虫的毒理效应及防治试验［J］．华南农业大学学报，1988，19（4）：14．
［7］石启田．天然银杏树脂水剂防治蚜虫、菜青虫药效试验［J］．农药，2000，39（9）：28．
【收稿日期】2010年10月18日
【作者简介】刘明石（1983-）：男，吉林吉林人，学士学位，吉林大学珠海学院化学药学系教师。花鑫：吉林大学珠海学院。张瑶：吉林大学珠海学院。宣刚：黑龙江安康医院。
【关键词】毒芹；初提取物；杀虫效果
【中图分类号】TQ453【文献标识码】A
【文章编号】1007-4309（2010）12-0071-3
我国植物源杀虫剂的发展具有悠久的历史。植物源杀虫剂除具有与有机合成杀虫剂相同的作用方式（触杀、胃毒、熏蒸）外，还具有拒食、抑制生长发育、忌避忌产卵、麻醉、抑制种群形成等特异的作用方式。目前已有苦参碱水剂、烟碱乳油、楝素乳油、鱼藤酮乳油等开发成功，取得登记生产。开发植物源农药是现代农药研究的一个重要发展方向。
毒芹（cicuta virosa L．）是伞形科的多年生有毒草本植物，主要分布在我国北方地区。植株高大，最高可达1m以上，基生叶，茎杆中空，折断后有刺激性气味。外型酷似芹菜；叶为2-3或4回羽状复叶，羽片边缘有锯齿；基生叶及茎下部的叶有长柄，叶片羽状分裂，基部扩展成鞘状；复伞形花序，花白色顶生；双悬果卵球形，有黄色粗棱；花期7-8月，果期8-9月。喜在河边、沟旁、沼泽地、沼泽草甸和林缘草甸生长。全草有毒，但根茎含毒性物质最丰富。在水中或水边生长的毒芹须根系发达，主根不发达，在相对干的土壤中则主根发达且明显肉质化。其中能引起运动神经末端麻痹的主要有毒成分是毒芹碱（coniine），其次是毒芹侧碱（coniceine））、甲基毒芹碱（N-methylconiine）、羟基毒芹碱（conhydrine）、伪羟基毒芹碱（pseudoconhydrine）等甾类生物碱。
由于关于毒芹碱杀虫活性的研究在国内外很少，对深入研究毒芹具有重要价值。本实验采用300倍和600倍两种浓度对三种初提取物进行稀释，通过毒杀巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫及蚜虫，进行数据方差分析。
一、材料与方法
（一）试验材料
采自吉林市昌邑区左家镇育才桥旁苗圃园中的毒芹，选取毒芹根茎为试验品；供试害虫为巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫、蚜虫。
（二）仪器
索式提取器、连续回流提取器、渗滤装置、电热套、水浴锅、8层纱布、分析天平、烧杯、容量瓶、培养皿、解剖针、喷壶、镊子。
（三）试剂
95%乙醇、蒸馏水、5%碳酸钠。
（四）试验方法
1．试液提取
用分析天平3次称量毒芹饮片5g，误差在0.1以内。溶液A为95%乙醇溶液100V的电热套100℃加热，提取3.5h，所得到的初提取物。溶液B为95%乙醇溶液水浴90℃加热，提取3h，所得初提取物。溶液C为先用5%的碳酸钠溶液浸泡3h，再加入95%乙醇90℃提取3h，所得初提取物。
采用乙醇浸提的方法，经减压蒸馏获得粗初提物，所得不同种类的实验药剂见表1。
表1各种初提取物浓度及其在实验中的处理号
（注：其中A、B、C均为毒芹的根茎，1代表初提取物300倍处理，2代表初提取物600倍处理。表中前面數字为实验中的药剂处理号，A为95%乙醇提取3.5h得初提取物，B为95%乙醇提取3h所得初提取物，C为5%的碳酸钠溶液浸泡3h后用95%乙醇提取所得初提取物。）
2．杀虫实验设计
各组试验均设置四次重复。药剂处理后24h、48h、72h调查试虫死亡情况，计算死亡率及校正死亡率。以肉眼直接观察，检查死活虫数，中毒后的害虫，经解剖针轻轻触动，肢体能动但不能爬行，仰翻或完全不动，视为死亡。
巢蛾幼虫、舞毒蛾采用直接虫体喷洒法。
校正死亡率%=×100
菜青虫采用非选择性拒食率的测定方法。
拒食率%=×100%
蚜虫试验采用叶片喷雾喂食法，计算死亡率及校正死亡率。
二、结果与分析
（一）毒芹初提取物对巢蛾幼虫杀虫效果的试验
图1毒芹初提取物对巢蛾幼虫杀虫效果
表2处理后巢蛾幼虫死亡率的统计
由图1和表2对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对巢蛾幼虫48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，效果不显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较；效果不显著；C1与C2相比较，C1显著。在相同条件下杀虫，A与B比较，A显著；A与C比较，A显著；B与C比较，B显著。可知毒芹初提取物对巢蛾幼虫具有杀虫效果，且300倍效果要好于600倍。
（二）毒芹初提取物对舞毒蛾杀虫效果的试验
由图2和表3对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对舞毒蛾48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，A2效果显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较，B2效果显著；C1与C2相比较，C1显著。可知，在相同条件下毒芹初提取物对舞毒蛾的作用，A效果显著，B次之，C最弱。
（三）毒芹初提取物对菜青虫拒食活性的试验
由图3和表4进行方差分析得到，初提取物A、B、C对菜青虫48h后拒食活性效果，A1与A2比较，无明显差异；A2与B1比较，无明显差异；B1与B2比较，B1效果显著；B2与C1比较，B2效果显著，C2基本对菜青虫拒食无影响。A1、A2、B1三者对菜青虫拒食都有明显效果。
（四）毒芹初提取物对蚜虫杀虫效果的试验
由图4和表5对48h后数据进行方差分析得到，初提取物A、B、C对蚜虫48h后杀虫效果，A1与A2相比较，A1效果显著；A2与B1比较，A2显著；B1与B2相比较，B1显著；B2与C1比较，B2显著；C1与C2相比较，C1显著。可知，在相同条件下对蚜虫的作用，A显著，B次之，C最弱。
三、结论
本实验以毒芹碱具有杀虫作用为机理，通过对毒芹根进行不同提取获得初提取物A、B、C配制300倍和600倍来毒杀巢蛾幼虫、舞毒蛾、菜青虫及蚜虫。得到毒芹碱属于急性药物，对害虫毒杀以内吸作用为主，不同提取方法毒芹碱含量不同，其中初提取物以95%乙醇提取3.5h为佳，浓度以300倍稀释液对杀虫效果最好，且对菜青虫的拒食有一定影响。该试验为植物源农药的开发利用提供了一定的物质基础。
【参考文献】
［1］何康等主编．中国农业百科全书·农药卷［M］．北京：农业出版社，1993．
［2］赵善欢，张兴．植物性物质川楝素的研究概况［J］．华南农业大学学报，1987，8（2）：57-67．
［3］江苏新医学院编．中药大词典（上册）［M］．上海：上海人民出版社，1997，1499．
［4］施大钊，郭喜红，李安陆．毒芹生物碱的提取及对害鼠的毒性试验［J］．植物保护与推广，2002，22（6）：27-29．
［5］胡美英，徐汉虹．羊角扭对菜粉蝶幼虫的生物活性及药效的研究［J］．华南农业大学学报，2000，21（1）．
［6］童红云，赵善欢．雷公藤对菜青虫的毒理效应及防治试验［J］．华南农业大学学报，1988，19（4）：14．
［7］石启田．天然银杏树脂水剂防治蚜虫、菜青虫药效试验［J］．农药，2000，39（9）：28．
【收稿日期】2010年10月18日
【作者简介】刘明石（1983-）：男，吉林吉林人，学士学位，吉林大学珠海学院化学药学系教师。花鑫：吉林大学珠海学院。张瑶：吉林大学珠海学院。宣刚：黑龙江安康医院。