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摘 要：目的：比较三种根管充填系统的根尖封闭性能。方法：选取40颗单根管前牙，冠向下法根管预备后，分别充填GP/AHPlus、GP/ZOE、Resilon/Epiphany三种根管充填系统，浸入亚甲基蓝溶液中1周，样本透明后测量染料渗入深度。结果：各实验组之间渗漏具有统计学差异（P<0.05），GP/AHPlus的渗漏量为0.77±0.33 mm，GP/ZOE、Resilon/Epiphany的渗漏量为5.20±3.57 mm和4.96±2.37 mm，两者比较无显著性差异。结论：GP/AHPlus根管充填系统的根尖封闭性优于GP/ZOE、Resilon/Epiphany，后两者具有相似的根尖封闭性。
关键词：根管封闭剂；根管充填材料；微渗漏；根尖封闭性
Abstracts：Objective： To evaluate the apical sealing ability of three kinds of root canal filling materials GP/AHPlus， GP/ZOE and Resilon/Epiphany. Methods： 40 extracted anterior teeth were filled with GP/AHPlus， GP/ZOE and Resilon/Epiphany after root canal prepared by crown down technique. Apical sealing ability were determined using dye infiltration for 1 week and the microleakage was evaluated by the length of dye. Results： The mean leakage was 0.77±0.33 mm in GP/AHPlus， 5.20±3.57 mm in GP/ZOE， 4.96±2.37 mm in Resilon/Epiphany，showing significant difference between the three root canal filling system（P<0.05） and no great difference between GP/ZOE and Resilon/Epiphany （P>0.05）. Conlusions： GP/AHPlus has better apical sealing ability than GP/ZOE and Resilon/Epiphany， with similar apical sealing ability in GP/ZOE and Resilon/Epiphany.
Keywords： root canal sealer； root canal filling materials； microleakage； apical sealing ability
根管治疗是牙髓根尖周病变的主要治疗方法，主要是通过对根管预备后进行严密的三维充填，封闭整个根管系统。根管充填材料决定根管充填的质量，是影响根管治疗成功与否的关键，60%的根管治疗失败原因是不完善的根管充填[1]，充填材料与根管壁之间遗留空隙，根管牙本质残留的微生物、根尖周组织液等进入根管内，导致根尖周组织病变复发。牙胶尖与根管封闭剂充填根管系统是临床上常用的根管充填系统，理想的根管充填材料应具有良好的根尖封闭性，本实验通过微渗漏实验评价三种根管充填系统的根尖封闭性，为临床选择理想的根管充填材料提供理论依据。
材料与方法
1 离体牙收集
收集因牙周病或正畸治疗需要拔出的离体前牙40颗，去除有牙体表面裂纹、龋坏、牙根弯曲及根尖开放的牙齿，刮匙去除表面的软组织、牙石和色素沉着等，清洗后浸入2.5%次氯酸钠溶液中，4℃冰箱保存备用。
AHPlus（Dentsply，美国），牙胶尖（Dentsply，美国），Resilon/Epiphany（Sybron Endo，美国）
2 样本制备
工作长度测定：金刚砂车针沿秞牙骨质界（amelo-cemental junction）去除牙冠，保持牙根长度约14mm，#15 k锉插入根管至全长通畅根管，直到根尖孔可见锉尖，记录长度，将所测长度减去1mm为根管的工作长度。
根管预备：采用Protaper预备系统由冠方向根方预备根管。首先SX锉扩大根管口，S1和S2以根管工作长度预备根管中段，F1、F2和F3以根管工作长度预备根管下段，每换锉采用5.25%次氯酸钠（sodium hypochlorite，NaOCl）和17%EDTA冲洗根管以去除根管牙本质表面的碎屑，保持根管清洁，预备结束后生理盐水冲洗根管，纸尖蘸干待用。
实验分组：样本分为实验组A（n=10）：牙胶尖（Gutta purcha，GP）/氧化锌丁香油根管充填糊剂（Zinc oxide eugenol paste，ZOE）；实验组B（n=10）：GP/AH Plus；实验组C（n=10）：Resilon/Epiphany；阳性对照组（n=5）：牙胶尖；阴性对照组（n=5）：GP/ZOE。
所有样本按照厂家说明使用，采用冷测压技术充填。充填结束后，将所有的样本置37℃，100%湿度恒温箱1周，待充填材料完全固化。
3 根尖封闭性检测
将三组实验组样本在距离根尖2mm处牙根表面涂布两层指甲油，阴性对照组样本所有表面皆涂布两层指甲油，阳性对照组样本表面未涂布指甲油。将所有样本浸没于2%亚甲基蓝溶液中，置于37℃，100%湿度恒温箱1周后取出，流水冲洗30min，手术刀片去除牙根表面的所有指甲油，置于5%盐酸溶液中7d，每24小时更换盐酸溶液，取出脱钙的牙根流水冲洗30min，放入75%、80%、90%、95%、100%的乙醇中进行梯度脱水各12h，最后置水杨酸甲酯溶液中透明保存。 4 微渗漏长度测量
将浸有水杨酸甲酯的透明牙根置于显微镜下观察，测量并记录各牙根的根管充填材料周围的近中、远中、颊面和舌面染料的渗入深度，取平均值作为该样本的染料渗入深度。
5 统计学分析
采用SPSS15.0对数据进行统计学分析，对渗漏量进行单因素方差分析（one-way ANOVA）和两两比较的Bonferroni分析，P<0.05为差异具有统计学意义。
结果
各组样本经亚甲基蓝染色并进行标本透明后，肉眼即可见牙根内的根管充填材料，见亚甲基蓝溶液渗入根尖区充填材料显示为蓝色，测量染色的最长距离。结果显示阳性对照组所有样本染色皆达根管全长，阴性对照组未见有染料的渗入，各实验组染料的渗入长度见表1. GP/AHPlus的渗漏量为0.77±0.33 mm，GP/ZOE与Resilon/Epiphany的渗漏量为5.20±3.57 mm和4.96±2.37 mm。方差分析ANOVA显示P=0.001<0.05，差异具有统计学意义；两两比较的Bonferroni分析显示GP/AHPlus与GP/ZOE、Resilon/Epiphany有统计学差异，显示较好的根尖封闭性，GP/ZOE与Resilon/Epiphany两组间无明显差异，两者具有相似的根尖封闭性。
表1 各组根管充填系统染料渗漏量
讨论
理想的根管充填材料应具有良好的生物相容性，持有的根尖封闭性、抗微生物作者用、体积稳定、X线阻射作用等，其中充填材料良好的根尖封闭性尤为重要，可防止根尖孔外的组织液、细菌及其产物进入根管系统，降低根管的再感染，促进根尖周病变的愈合，提高临床成功率。
根管充填材料包括核心充填材料和封闭剂，其中牙胶尖和氧化锌丁香油糊剂是国内临床上最常用充填材料。牙胶具有生物惰性，对根尖周组织刺激小，过敏反应少[2]，氧化锌丁香油糊剂因具有收敛和杀菌作用，因此对根尖周组织具有一定的刺激性[3]，且牙胶与氧化锌丁香油糊剂无粘接性，两者间可产生间隙，引发微渗漏。AHPlus为环氧树脂类封闭剂，其虽能与牙本质形成良好粘接，但与牙胶之间的惰性结合无法避免牙胶尖与封闭剂界面之间的微渗漏[4]。随着冠方牙本质粘接技术的发展，根管内牙本质粘接充填材料出现，2004年，Shipper和Trope提出树脂类根管核心充填材料、根管封闭剂和根管壁牙本质之间形成“一体化”结构，即根管充填系统与牙根形成一个整体，从而提高牙根的抗着性，将“Monoblock”新概念引入根管系统[5]。代表产品为Resilon/Epiphany，为甲基丙烯酸脂类根管充填材料，其封闭剂Epiphany具有同时与核心充填材料Resilon和根管壁牙本质粘接的性能，使该充填系统在临床上开始应用[6]。本实验选用三种根管充填系统GP/ZOE、GP/AHPlus和Resilon/Epiphany三种根管充填系统进行根尖封闭性的研究，为指导临床应用提供实验依据。
检测根尖封闭性的方法有染料渗漏、细菌渗漏、葡萄糖微渗漏等，其中染料微渗漏是评价根管充填系统根尖封闭性最常用的方法，将涂有指甲油的样本浸入特定的染色剂中染色，一定时间后观察根管充填材料中染液的渗入长度[7]。本实验选用亚甲基蓝溶液作为染液，实验结束后通过脱钙、脱水等将标本透明，三维观察染液的渗入情况[8]。结果显示GP/AHPlus的渗漏量为0.77±0.33 mm，显示较好的根尖封闭性，而GP/ZOE与Resilon/Epiphany的渗漏量为5.20±3.57 mm和4.96±2.37 mm，无统计学差异，两者具有相似的根尖封闭性。分析原因可能为AH Plus由于其具有良好的流动性及较长的固化时间可充分进入牙本质小管，与根管壁牙本质胶原纤维形成机械嵌合，且聚合收缩应力小，甚至无应力释放，对界面的影响作用小[9，10]，显示该根管充填系统较好的根尖封闭性能。ZOE封闭剂具有一定的溶解性，使其与牙胶之间产生间隙，导致较大的根尖微渗漏，根尖封闭性降低。Resilon为热塑性聚己酸内酯聚合物，由于甲基丙烯酸含量较低（聚己酸内酯：甲基丙烯酸=10：1）[11]，降低其与封闭剂Epiphany的广泛粘接，影响根尖封闭性能；且甲基丙烯酸脂类根管封闭剂Epiphany，固化过程中产生收缩[12]，引起与核心充填材料Resilon和根管壁产生间隙，也是导致根尖封闭性降低的原因。
参考文献：
[1] Karagz-Küükay I， Küükay S， Bayirli G.Factors affecting apical leakage assessment. J Endod. 1993，19（7）：362-5.
[2] 樊明文，周学东。牙体牙髓病学.第2版.北京：人民卫生出版社，2003，265
[3] Zmener O， Pameijer CH， Kokubu GA，et al.Subcutaneous connective tissue reaction to methacrylate resin-based and zinc oxide and eugenol sealers.J Endod. 2010，36（9）：1574-9.
[4] Resende LM， Rached-Junior FJ， Versiani MA， et al. A comparative study of physicochemical properties of AH Plus， Epiphany， and Epiphany SE root canal sealers. Int Endod J. 2009，42：785-793.
[5] Shipper G， ？rstavik D， Teixeira FB， Trope M. An evaluation of microbial leakage in roots filled with a thermoplastic synthetic polymer-based root canal filling material （Resilon）.J Endod. 2004 May；30（5）：342-7. [6] Fang J， Mai S， Ling J， et al.In vitro evaluation of bond strength and sealing ability of a new low-shrinkage， methacrylate resin-based root canal sealer.J Formos Med Assoc. 2012，111（6）：340-6.
[7] Depraet FJ， De Bruyne MA， De Moor RJ. The sealing ability of an epoxy resin root canal sealer after Nd：YAG laser irradiation of the root canal. Int Endod J. 2005，38：302-309.
[8] Goldberg F， Artaza LP， De Silvio A. Apical sealing ability of a new glass ionomer root canal sealer. J Endod. 1995，21（10）：498-500.
[9]Hammad M， Qualtrough A， Silikas N. Extended setting shrinkage behavior of endodontic sealers.J Endod. 2008，34：90-3.
[10] Braga RR， Ferracane JL， Condon JR. Polymerization contraction stress in dual-cure cements and its effect on interfacial integrity of bonded inlays.J Dent. 2002，30：333-340.
[11] Tay FR， Hiraishi N， Pashley DH， et al. Bondability of Resilon to a methacrylate- based root canal sealer.J Endod. 2006，32：133-137.
[12] Bouillaguet S， Wataha JC， Tay FR， et al. Initial in vitro biological response to contemporary endodontic sealers.J Endod. 2006，32：989-992.
关键词：根管封闭剂；根管充填材料；微渗漏；根尖封闭性
Abstracts：Objective： To evaluate the apical sealing ability of three kinds of root canal filling materials GP/AHPlus， GP/ZOE and Resilon/Epiphany. Methods： 40 extracted anterior teeth were filled with GP/AHPlus， GP/ZOE and Resilon/Epiphany after root canal prepared by crown down technique. Apical sealing ability were determined using dye infiltration for 1 week and the microleakage was evaluated by the length of dye. Results： The mean leakage was 0.77±0.33 mm in GP/AHPlus， 5.20±3.57 mm in GP/ZOE， 4.96±2.37 mm in Resilon/Epiphany，showing significant difference between the three root canal filling system（P<0.05） and no great difference between GP/ZOE and Resilon/Epiphany （P>0.05）. Conlusions： GP/AHPlus has better apical sealing ability than GP/ZOE and Resilon/Epiphany， with similar apical sealing ability in GP/ZOE and Resilon/Epiphany.
Keywords： root canal sealer； root canal filling materials； microleakage； apical sealing ability
根管治疗是牙髓根尖周病变的主要治疗方法，主要是通过对根管预备后进行严密的三维充填，封闭整个根管系统。根管充填材料决定根管充填的质量，是影响根管治疗成功与否的关键，60%的根管治疗失败原因是不完善的根管充填[1]，充填材料与根管壁之间遗留空隙，根管牙本质残留的微生物、根尖周组织液等进入根管内，导致根尖周组织病变复发。牙胶尖与根管封闭剂充填根管系统是临床上常用的根管充填系统，理想的根管充填材料应具有良好的根尖封闭性，本实验通过微渗漏实验评价三种根管充填系统的根尖封闭性，为临床选择理想的根管充填材料提供理论依据。
材料与方法
1 离体牙收集
收集因牙周病或正畸治疗需要拔出的离体前牙40颗，去除有牙体表面裂纹、龋坏、牙根弯曲及根尖开放的牙齿，刮匙去除表面的软组织、牙石和色素沉着等，清洗后浸入2.5%次氯酸钠溶液中，4℃冰箱保存备用。
AHPlus（Dentsply，美国），牙胶尖（Dentsply，美国），Resilon/Epiphany（Sybron Endo，美国）
2 样本制备
工作长度测定：金刚砂车针沿秞牙骨质界（amelo-cemental junction）去除牙冠，保持牙根长度约14mm，#15 k锉插入根管至全长通畅根管，直到根尖孔可见锉尖，记录长度，将所测长度减去1mm为根管的工作长度。
根管预备：采用Protaper预备系统由冠方向根方预备根管。首先SX锉扩大根管口，S1和S2以根管工作长度预备根管中段，F1、F2和F3以根管工作长度预备根管下段，每换锉采用5.25%次氯酸钠（sodium hypochlorite，NaOCl）和17%EDTA冲洗根管以去除根管牙本质表面的碎屑，保持根管清洁，预备结束后生理盐水冲洗根管，纸尖蘸干待用。
实验分组：样本分为实验组A（n=10）：牙胶尖（Gutta purcha，GP）/氧化锌丁香油根管充填糊剂（Zinc oxide eugenol paste，ZOE）；实验组B（n=10）：GP/AH Plus；实验组C（n=10）：Resilon/Epiphany；阳性对照组（n=5）：牙胶尖；阴性对照组（n=5）：GP/ZOE。
所有样本按照厂家说明使用，采用冷测压技术充填。充填结束后，将所有的样本置37℃，100%湿度恒温箱1周，待充填材料完全固化。
3 根尖封闭性检测
将三组实验组样本在距离根尖2mm处牙根表面涂布两层指甲油，阴性对照组样本所有表面皆涂布两层指甲油，阳性对照组样本表面未涂布指甲油。将所有样本浸没于2%亚甲基蓝溶液中，置于37℃，100%湿度恒温箱1周后取出，流水冲洗30min，手术刀片去除牙根表面的所有指甲油，置于5%盐酸溶液中7d，每24小时更换盐酸溶液，取出脱钙的牙根流水冲洗30min，放入75%、80%、90%、95%、100%的乙醇中进行梯度脱水各12h，最后置水杨酸甲酯溶液中透明保存。 4 微渗漏长度测量
将浸有水杨酸甲酯的透明牙根置于显微镜下观察，测量并记录各牙根的根管充填材料周围的近中、远中、颊面和舌面染料的渗入深度，取平均值作为该样本的染料渗入深度。
5 统计学分析
采用SPSS15.0对数据进行统计学分析，对渗漏量进行单因素方差分析（one-way ANOVA）和两两比较的Bonferroni分析，P<0.05为差异具有统计学意义。
结果
各组样本经亚甲基蓝染色并进行标本透明后，肉眼即可见牙根内的根管充填材料，见亚甲基蓝溶液渗入根尖区充填材料显示为蓝色，测量染色的最长距离。结果显示阳性对照组所有样本染色皆达根管全长，阴性对照组未见有染料的渗入，各实验组染料的渗入长度见表1. GP/AHPlus的渗漏量为0.77±0.33 mm，GP/ZOE与Resilon/Epiphany的渗漏量为5.20±3.57 mm和4.96±2.37 mm。方差分析ANOVA显示P=0.001<0.05，差异具有统计学意义；两两比较的Bonferroni分析显示GP/AHPlus与GP/ZOE、Resilon/Epiphany有统计学差异，显示较好的根尖封闭性，GP/ZOE与Resilon/Epiphany两组间无明显差异，两者具有相似的根尖封闭性。
表1 各组根管充填系统染料渗漏量
讨论
理想的根管充填材料应具有良好的生物相容性，持有的根尖封闭性、抗微生物作者用、体积稳定、X线阻射作用等，其中充填材料良好的根尖封闭性尤为重要，可防止根尖孔外的组织液、细菌及其产物进入根管系统，降低根管的再感染，促进根尖周病变的愈合，提高临床成功率。
根管充填材料包括核心充填材料和封闭剂，其中牙胶尖和氧化锌丁香油糊剂是国内临床上最常用充填材料。牙胶具有生物惰性，对根尖周组织刺激小，过敏反应少[2]，氧化锌丁香油糊剂因具有收敛和杀菌作用，因此对根尖周组织具有一定的刺激性[3]，且牙胶与氧化锌丁香油糊剂无粘接性，两者间可产生间隙，引发微渗漏。AHPlus为环氧树脂类封闭剂，其虽能与牙本质形成良好粘接，但与牙胶之间的惰性结合无法避免牙胶尖与封闭剂界面之间的微渗漏[4]。随着冠方牙本质粘接技术的发展，根管内牙本质粘接充填材料出现，2004年，Shipper和Trope提出树脂类根管核心充填材料、根管封闭剂和根管壁牙本质之间形成“一体化”结构，即根管充填系统与牙根形成一个整体，从而提高牙根的抗着性，将“Monoblock”新概念引入根管系统[5]。代表产品为Resilon/Epiphany，为甲基丙烯酸脂类根管充填材料，其封闭剂Epiphany具有同时与核心充填材料Resilon和根管壁牙本质粘接的性能，使该充填系统在临床上开始应用[6]。本实验选用三种根管充填系统GP/ZOE、GP/AHPlus和Resilon/Epiphany三种根管充填系统进行根尖封闭性的研究，为指导临床应用提供实验依据。
检测根尖封闭性的方法有染料渗漏、细菌渗漏、葡萄糖微渗漏等，其中染料微渗漏是评价根管充填系统根尖封闭性最常用的方法，将涂有指甲油的样本浸入特定的染色剂中染色，一定时间后观察根管充填材料中染液的渗入长度[7]。本实验选用亚甲基蓝溶液作为染液，实验结束后通过脱钙、脱水等将标本透明，三维观察染液的渗入情况[8]。结果显示GP/AHPlus的渗漏量为0.77±0.33 mm，显示较好的根尖封闭性，而GP/ZOE与Resilon/Epiphany的渗漏量为5.20±3.57 mm和4.96±2.37 mm，无统计学差异，两者具有相似的根尖封闭性。分析原因可能为AH Plus由于其具有良好的流动性及较长的固化时间可充分进入牙本质小管，与根管壁牙本质胶原纤维形成机械嵌合，且聚合收缩应力小，甚至无应力释放，对界面的影响作用小[9，10]，显示该根管充填系统较好的根尖封闭性能。ZOE封闭剂具有一定的溶解性，使其与牙胶之间产生间隙，导致较大的根尖微渗漏，根尖封闭性降低。Resilon为热塑性聚己酸内酯聚合物，由于甲基丙烯酸含量较低（聚己酸内酯：甲基丙烯酸=10：1）[11]，降低其与封闭剂Epiphany的广泛粘接，影响根尖封闭性能；且甲基丙烯酸脂类根管封闭剂Epiphany，固化过程中产生收缩[12]，引起与核心充填材料Resilon和根管壁产生间隙，也是导致根尖封闭性降低的原因。
参考文献：
[1] Karagz-Küükay I， Küükay S， Bayirli G.Factors affecting apical leakage assessment. J Endod. 1993，19（7）：362-5.
[2] 樊明文，周学东。牙体牙髓病学.第2版.北京：人民卫生出版社，2003，265
[3] Zmener O， Pameijer CH， Kokubu GA，et al.Subcutaneous connective tissue reaction to methacrylate resin-based and zinc oxide and eugenol sealers.J Endod. 2010，36（9）：1574-9.
[4] Resende LM， Rached-Junior FJ， Versiani MA， et al. A comparative study of physicochemical properties of AH Plus， Epiphany， and Epiphany SE root canal sealers. Int Endod J. 2009，42：785-793.
[5] Shipper G， ？rstavik D， Teixeira FB， Trope M. An evaluation of microbial leakage in roots filled with a thermoplastic synthetic polymer-based root canal filling material （Resilon）.J Endod. 2004 May；30（5）：342-7. [6] Fang J， Mai S， Ling J， et al.In vitro evaluation of bond strength and sealing ability of a new low-shrinkage， methacrylate resin-based root canal sealer.J Formos Med Assoc. 2012，111（6）：340-6.
[7] Depraet FJ， De Bruyne MA， De Moor RJ. The sealing ability of an epoxy resin root canal sealer after Nd：YAG laser irradiation of the root canal. Int Endod J. 2005，38：302-309.
[8] Goldberg F， Artaza LP， De Silvio A. Apical sealing ability of a new glass ionomer root canal sealer. J Endod. 1995，21（10）：498-500.
[9]Hammad M， Qualtrough A， Silikas N. Extended setting shrinkage behavior of endodontic sealers.J Endod. 2008，34：90-3.
[10] Braga RR， Ferracane JL， Condon JR. Polymerization contraction stress in dual-cure cements and its effect on interfacial integrity of bonded inlays.J Dent. 2002，30：333-340.
[11] Tay FR， Hiraishi N， Pashley DH， et al. Bondability of Resilon to a methacrylate- based root canal sealer.J Endod. 2006，32：133-137.
[12] Bouillaguet S， Wataha JC， Tay FR， et al. Initial in vitro biological response to contemporary endodontic sealers.J Endod. 2006，32：989-992.