【摘 要】
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目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用.方法:
【机 构】
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南京医科大学第一临床学院,江苏南京210029徐州医科大学附属医院血液科,江苏徐州221002;徐州医科大学附属医院血液科,江苏徐州,221002;
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目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用.方法:聚合酶链式反应检测Sup-B15细胞及Ph+ ALL原代细胞NFATmRNA的转录水平;流式细胞术检测Sup-B15细胞P-糖蛋白表达;Western blot检测Sup-B15细胞NFAT蛋白的变化Annexin Ⅴ/7-AAD标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;Fluo 3-AM染料标记细胞,流式细胞术检测共培养后白血病细胞Ca2+浓度变化.结果:Sup-B15细胞及Ph+ ALL原代细胞中均可检测到NFAT表达;流式细胞术未检测到Sup-B 15细胞表达P-糖蛋白;临床应用的治疗浓度(2.5和5μmol/L)的环孢素(CAS)可明显抑制NFAT蛋白表达,其中5μmol/L CAS抑制作用更明显;临床治疗浓度CAS(2.5和5μmol/L)对Sup-B 15细胞的凋亡无明显影响,而较高浓度CAS(10μmol/L)可诱导Sup-B15细胞的凋亡.骨髓基质细胞OP9可使Sup-B15细胞及Ph十ALL原代细胞对伊马替尼的敏感性下降;与骨髓基质细胞OP9共培养后Sup-B15细胞Ca2+浓度升高,总NFAT蛋白水平及核蛋白水平均增加;在共培养体系中加入环孢素抑制Ca2+-NFAT信号通路,可降低OP9对Sup-B 15细胞的保护作用.结论:Ca2+-NFAT信号通路有助于Ph+ ALL细胞的存活,骨髓基质细胞可通过活化Ca2+-NFAT信号通路介导Ph+ ALL细胞对IM的耐药.
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