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采用正交分析方法,对影响冬虫夏草菌株原生质体制备与再生的主要因素进行研究。结果表明,最佳条件组合为培养3d的菌丝体,在2.0%溶壁酶+1.0%蜗牛酶的酶液中,0.6mol/L的KCl作为原生质体制备的渗稳剂,0.6mol/L的甘露醇作为再生培养基的渗稳剂,32℃酶解2h。在此条件下,原生质体得率可达到2.98×108/ml,再生率可达到42.09×10-2。