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目的
探讨脐带血衍生间质干细胞(UCB-MSCs)体外抑制C6胶质瘤细胞增殖、诱导凋亡的机制。
方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测C6细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和Caspase-3 mRNA水平,膜联蛋白V(Annexin V)-碘化丙锭(PI)双染法检测细胞凋亡。
结果混合UCB-MSCs在转录水平上有使Caspase-8、bax、Caspase-3 mRNA表达增高的趋势,bcl-2 mRNA表达降低的趋势。促凋亡蛋白表达量和凋亡细胞数随E/T(E:效应细胞即UCB-MSCs,T:靶细胞即C6细胞)的比例增高而增高,呈现比例依赖关系;E∶T=(5+5)∶1,RT-PCR检测C6细胞Caspase-8、bax、bcl-2和Caspase-3 mRNA相对表达量分别为0.78±0.13、0.28±0.03、0.70±0.08、0.76±0.12。当E/T=0∶1、5∶1、(2.5+2.5)∶1、10∶1、(5+5)∶1时,Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)和PI双染色检测凋亡C6细胞数量分别为(2.9±0.6)、(3.1±0.5)、(14.5±1.8)、(14.3±2.2)、(22.8±4.5)个。
结论经植物凝集素(PHA)刺激后,大剂量UCB-MSCs和混合UCB-MSCs都对体外C6细胞具有抑制增殖作用,而且这种抑制作用可能与诱导凋亡明显相关。