检测长链非编码RNA缺氧诱导因子-1α-反义链2(lncRNA-HIF1A-AS2)在肝癌组织及肝癌细胞株中的表达并探讨其对肝癌增殖和侵袭能力的影响。
方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HIF1A-AS2在49例肝癌患者的癌组织及其癌旁组织以及4种肝癌细胞株(Huh7、HepG2、SMMC-7721、Bel-7402)和正常肝细胞L02的表达,并分析HIF1A-AS2表达与临床病理特征之间的联系;选取两种高表达HIF1A-AS2肝癌细胞分别转染小干扰RNA(si-HIF1A-AS2)和阴性对照(si-NC);利用细胞增殖-毒性检测实验(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖能力;利用Transwell实验检测细胞侵袭能力。
结果HIF1A-AS2在肝癌组织中的表达高于癌旁组织(-12.060±0.657比-12.450±0.683,P<0.01);HIF1A-AS2表达与年龄、肿瘤大小和肿瘤分化相关(χ2=4.573、4.871、8.353,P<0.05);在肝癌细胞株的表达也明显高于正常肝细胞株,其中在Huh7和HepG2的表达最高(Huh7:5.349±0.992,HepG2:5.660±0.726,P<0.01);CCK-8和平板克隆显示转染si-HIF1A-AS2后,细胞增殖能力明显低于对照组(Huh7:0.668±0.067比0.558±0.055,0.931±0.881比0.670±0.072,1.769±0.079比1.036±0.074;HepG2:1.063±0.060比0.803±0.097,1.767±0.091比1.083±0.080,P<0.01)(Huh7:542.70±25.50比378.00±19.31,HepG2:530.00±14.53比217.30±18.15,P<0.01);侵袭实验显示转染si-HIF1A-AS2后,细胞侵袭数明显低于对照组[Huh7:(116.300±6.506)个比(52.000±9.539)个,HepG2:(88.330±5.686)个比(55.000±5.245)个,P<0.01]。
结论HIF1A-AS2在肝癌及细胞株中高表达,下调HIF1A-AS2表达可以抑制肝癌细胞的增殖和侵袭能力。