【摘 要】
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目的:获取人Hesl基因的启动子并对其进行活性分析。方法:以人Hela细胞基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Hesl基因5’侧翼序列,将扩增的片段与pMD18-T载体连接,然后利用双酶切进行鉴
【机 构】
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蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心,蚌埠医学院医学检验系,山东省聊城市第一人民医院检验科,蚌埠医学院组织移植省重点实验室
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目的:获取人Hesl基因的启动子并对其进行活性分析。方法:以人Hela细胞基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Hesl基因5’侧翼序列,将扩增的片段与pMD18-T载体连接,然后利用双酶切进行鉴定,并送测序;将测序正确的启动子插入pGI3-Basic,双酶切并测序鉴定。将测序正确的重组DNA质粒瞬时转染宫颈癌细胞,运用双荧光素酶报告基因检测系统检测其启动子的活性。结果:PCR扩增到的人Hesl基因启动子与基因库的序列完全一致,双荧光素酶报告基因检测系统显示其在宫颈癌细胞中具有启动子活性。结论:成功得到人
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