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摘要：采用超声波[1，2，3]提取法研究玉米须的不同部位的多糖提取工艺。采用改良苯酚-硫酸比色法于490nm波长处测定玉米须多糖的含量；采用反应时间、温度、次数、料液比等作为考察因素，以提取液中多糖含量为考察指标，通过单因素、正交试验，确定玉米须多糖的提取最优条件是：超声时间30分钟，温度80℃，次数4次，浸泡液为30倍。在最优条件下测得成熟期玉米须的花柱和柱头的多糖含量分别是8.16%和4.46%，成熟初期玉米须的花柱和柱头的多糖含量分别是7.87%和12.53%。由此可推断成熟期玉米须的花柱的多糖含量较高，而成熟初期玉米须柱头中多糖含量较高.
关键词：玉米须 多糖 超声提取 花柱 柱头
玉米须味淡，性平，有清血热、利尿、平肝、利胆等功效，用于治疗糖尿病、黄疸、麻疹、乳糜血尿、血崩等症，现代药理研究证明玉米须有显著的利尿效果和降血糖作用，近年来临床上用其提取物治疗糖尿病、高血压、肝炎、胆道结石、鼻炎及哮喘等症[3，4，5]。玉米须多糖是多聚糖，大部分由己糖或戊糖聚合而成；玉米须多糖无毒安全，降血糖、抗癌，具有免疫活性。本文采用超声法[2]提取玉米须中的多糖，对提取的工艺条件进行优化。用正交法得出超声法[6]最佳提取条件，在最佳工艺条件下测定不同时期不同部位玉米须多糖含量，为玉米须多糖的开发利用提供可靠的依据。
1 实验方法
1.1 多糖含量测定方法的确立
采用苯酚-硫酸法对玉米须中多糖进行定量分析。多糖遇浓硫酸主要水解为单糖，单糖迅速脱水生成糠醛衍生物然后与苯酚生成有色化合物，该化合物在490nm处有特征吸收，并且其吸收峰处的吸收值与多糖含量成线性关系。反应在40℃水浴0.5h效果最佳。
1.2 葡萄糖标准曲线的绘制
称取在105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品进行标准曲线绘制，结果葡萄糖浓度在60～140μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。得到回归方程为:y=0.0038+5.92x，相关系数r=0.9999。实验表明，重现性试验RSD<1.5%，加样回归率为100.46%，均符合要求。
1.3 玉米须多糖提取工艺研究
1.3.1 温度对多糖提取率的影响
玉米须粉碎，过60目筛，干燥，称取3g，加入90mL蒸馏水，加热至60℃，分别按超生时间15分钟，30分钟，45分钟，60分钟，75分钟考察。离心后的提取液定容于容量瓶。应用苯酚-浓硫酸法测吸光度，通过标准曲线计算浓度，计算收率。
1.3.2 温度对多糖提取率的影响
称取与上述相同的玉米须3g，加入90mL蒸馏水，超声30分钟，温度按40℃，50℃，60℃，70℃，80℃考察。其他同上。
1.3.3 料液比对多糖提取率的影响
称取与上述相同的玉米须3g，超声温度60℃，超声30分钟，料液比按1:20，1:30，1:40，1:50考察。其他同上。
1.3.4 超声次数对多糖提取率的影响
称取玉米须3g，加入90mL蒸馏水，超声温度60℃，超声30分钟，次数按1，2，3，4，5次考察。其他同上。
1.4 超声法正交实验
1.4.1 实验因素设计
1.4.2 实验过程
实验数据采用四因素三水平正交实验表处理。结果见下表：
综上可知影响因素A>B>D>C，即超声温度，料液比，提取次数，而超声时间对其影响不大。最佳提取条件为：超声时间30分钟，温度80℃，次数4次，浸液倍数为30倍。
1.5 花柱和柱头中多糖含量的比较
1.5.1 成熟期玉米须的花柱和柱头多糖提取含量比较
取成熟期玉米须花柱和柱头分别粉碎，过60目筛，干燥至恒重，称取各3g，在最佳条件下提取多糖。含量分别是8.16%和4.46%。
1.5.2 成熟初期玉米须的花柱和柱头多糖提取含量比较
取成熟初期玉米须的花柱和柱头分别粉碎，其它同上。含量分别是7.87%和12.53%。
2 结论
2.1 超声提取最佳反应温度80℃，最佳加水量为30倍，最佳提取时间为45min；最佳提取次数4次。
2.2 超声法最佳工艺条件为：超声温度80℃，浸提倍数为30倍，超声时间30min，超声提取4次。成熟期玉米须中花柱的多糖含量较高，而成熟初期玉米须柱头中多糖含量较高，这可为工业生产提供价值导向。
参考文献：
[1]曾里，夏之宁.超声波和微波对中药提取的促进和影响[J].化学研究与应用，2002，14(3):245-249.
[2]冯若，赵逸云，李化茂，等.超声波在生物技术中应用的研究进展[J].生物化学与生物物理进展，1994，21(6):500-503 .
[3]魏宏明，李娜.玉米须多糖调节免疫功能研究[J].吉林工程技术师范学院，2007，23 (6):90-91.
[4]胡斌杰，韩艳霞，姬红.正交试验法提取灵芝多糖最佳工艺研究[J].中药材，2008，31(1):142-143.
[5]应奇才，华启红，蔡玲斐，等.玉米须多糖提取工艺的条件优化[J].中国生化药物杂志，2006，27（4）：233-234.
[6]Baoyang，YuemingJiang，Moumingzhao，Johnshi，Lingzhaowang，Effectsof uLtrasonic Extraction on the physicaL and chemicaL properities of poLysaccharides from Longan fruit pericarp[J]，poLymer degradation and stabiLity，2008，93；268-272.
关键词：玉米须 多糖 超声提取 花柱 柱头
玉米须味淡，性平，有清血热、利尿、平肝、利胆等功效，用于治疗糖尿病、黄疸、麻疹、乳糜血尿、血崩等症，现代药理研究证明玉米须有显著的利尿效果和降血糖作用，近年来临床上用其提取物治疗糖尿病、高血压、肝炎、胆道结石、鼻炎及哮喘等症[3，4，5]。玉米须多糖是多聚糖，大部分由己糖或戊糖聚合而成；玉米须多糖无毒安全，降血糖、抗癌，具有免疫活性。本文采用超声法[2]提取玉米须中的多糖，对提取的工艺条件进行优化。用正交法得出超声法[6]最佳提取条件，在最佳工艺条件下测定不同时期不同部位玉米须多糖含量，为玉米须多糖的开发利用提供可靠的依据。
1 实验方法
1.1 多糖含量测定方法的确立
采用苯酚-硫酸法对玉米须中多糖进行定量分析。多糖遇浓硫酸主要水解为单糖，单糖迅速脱水生成糠醛衍生物然后与苯酚生成有色化合物，该化合物在490nm处有特征吸收，并且其吸收峰处的吸收值与多糖含量成线性关系。反应在40℃水浴0.5h效果最佳。
1.2 葡萄糖标准曲线的绘制
称取在105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品进行标准曲线绘制，结果葡萄糖浓度在60～140μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。得到回归方程为:y=0.0038+5.92x，相关系数r=0.9999。实验表明，重现性试验RSD<1.5%，加样回归率为100.46%，均符合要求。
1.3 玉米须多糖提取工艺研究
1.3.1 温度对多糖提取率的影响
玉米须粉碎，过60目筛，干燥，称取3g，加入90mL蒸馏水，加热至60℃，分别按超生时间15分钟，30分钟，45分钟，60分钟，75分钟考察。离心后的提取液定容于容量瓶。应用苯酚-浓硫酸法测吸光度，通过标准曲线计算浓度，计算收率。
1.3.2 温度对多糖提取率的影响
称取与上述相同的玉米须3g，加入90mL蒸馏水，超声30分钟，温度按40℃，50℃，60℃，70℃，80℃考察。其他同上。
1.3.3 料液比对多糖提取率的影响
称取与上述相同的玉米须3g，超声温度60℃，超声30分钟，料液比按1:20，1:30，1:40，1:50考察。其他同上。
1.3.4 超声次数对多糖提取率的影响
称取玉米须3g，加入90mL蒸馏水，超声温度60℃，超声30分钟，次数按1，2，3，4，5次考察。其他同上。
1.4 超声法正交实验
1.4.1 实验因素设计
1.4.2 实验过程
实验数据采用四因素三水平正交实验表处理。结果见下表：
综上可知影响因素A>B>D>C，即超声温度，料液比，提取次数，而超声时间对其影响不大。最佳提取条件为：超声时间30分钟，温度80℃，次数4次，浸液倍数为30倍。
1.5 花柱和柱头中多糖含量的比较
1.5.1 成熟期玉米须的花柱和柱头多糖提取含量比较
取成熟期玉米须花柱和柱头分别粉碎，过60目筛，干燥至恒重，称取各3g，在最佳条件下提取多糖。含量分别是8.16%和4.46%。
1.5.2 成熟初期玉米须的花柱和柱头多糖提取含量比较
取成熟初期玉米须的花柱和柱头分别粉碎，其它同上。含量分别是7.87%和12.53%。
2 结论
2.1 超声提取最佳反应温度80℃，最佳加水量为30倍，最佳提取时间为45min；最佳提取次数4次。
2.2 超声法最佳工艺条件为：超声温度80℃，浸提倍数为30倍，超声时间30min，超声提取4次。成熟期玉米须中花柱的多糖含量较高，而成熟初期玉米须柱头中多糖含量较高，这可为工业生产提供价值导向。
参考文献：
[1]曾里，夏之宁.超声波和微波对中药提取的促进和影响[J].化学研究与应用，2002，14(3):245-249.
[2]冯若，赵逸云，李化茂，等.超声波在生物技术中应用的研究进展[J].生物化学与生物物理进展，1994，21(6):500-503 .
[3]魏宏明，李娜.玉米须多糖调节免疫功能研究[J].吉林工程技术师范学院，2007，23 (6):90-91.
[4]胡斌杰，韩艳霞，姬红.正交试验法提取灵芝多糖最佳工艺研究[J].中药材，2008，31(1):142-143.
[5]应奇才，华启红，蔡玲斐，等.玉米须多糖提取工艺的条件优化[J].中国生化药物杂志，2006，27（4）：233-234.
[6]Baoyang，YuemingJiang，Moumingzhao，Johnshi，Lingzhaowang，Effectsof uLtrasonic Extraction on the physicaL and chemicaL properities of poLysaccharides from Longan fruit pericarp[J]，poLymer degradation and stabiLity，2008，93；268-272.