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[目的]研究一种高效提取棉花细胞核的技术，为棉花大片段基因组文库的构建和全基因组测序提供技术。支持。[方法]采用“刀切法”，在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中，用锋利刀片切割发育1周的棉花黄化子叶以释放细胞核，并经过100、50、和30μm的膜过滤后离心收集细胞核，同时选取棉花幼嫩叶片和黄化处理时间不同的子叶分别用研磨法和刀切法作对照。[结果]刀切法所得细胞核干净完整杂质少，不需要研磨和巯基乙醇等处理，方便快捷无毒害，成功率达100％。[结论]建立了一种简单、高效快捷、无毒