【摘 要】
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目的 探讨乏氧状态下γ分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitors,DAPT)介导Notchl信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及相关机制.方法 以骨肉瘤细胞株MG
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科,湖北武汉,430022江汉大学附属第二医院(武汉市第五医院)骨科,湖北武汉,430050;华中科技大学同济医学院附属梨园医院骨科,湖北武汉,430077;华
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目的 探讨乏氧状态下γ分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitors,DAPT)介导Notchl信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及相关机制.方法 以骨肉瘤细胞株MG-63为研究对象,分为正常组(NC)、乏氧组(Hypoxia)和含有DAPT的乏氧组作为实验组(Hypoxia+DAPT).采用流式细胞仪检测处理后的细胞周期,CCK-8方法检测细胞的增殖能力,并使用Western Blot检测MG-63细胞株中Notchl、HIF-1α、Hes-1蛋白的表达情况,通过Transwell实验来验证其转移能力.同时探讨DAPT在乏氧环境下对细胞增殖和细胞周期方面的影响,分析其介导的Notch1下调情况及其抑制乏氧对MG-63细胞的促增殖作用.结果 与正常组相比较,乏氧组细胞的增殖能力及侵袭能力均较正常组有显著的提升,差异具有统计学意义(P＜0.05).而实验组与乏氧组相比较,γ泌酶抑制剂(DAPT)能显著降低其增殖及侵袭能力(P＜0.05).Western Blot结果显示,与正常组相比,乏氧组和实验组均可上调Notch1、HIF-1α、Hes-1相关蛋白的表达:但是与乏氧组对比,实验组可显著下调Notch1、HIF-1α、Hes-1蛋白的表达水平(P＜0.05).流式细胞仪结果显示:与正常组相比,乏氧组和实验组均可促进细胞由G1期转向G2期;而与乏氧组对比,实验组可显著抑制细胞由G1期转向G2期,使细胞周期停滞,差异具有统计学意义(P＜0.05).增殖实验结果显示,与正常组相比,乏氧组和实验组均可促进细胞增殖;而与乏氧组对比,实验组可显著抑制细胞增殖,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 γ分泌酶抑制剂可通过下调Notch1通路显著抑制乏氧状态下骨肉瘤细胞株MG-63的增殖与侵袭,阻断Notch1表达可能是潜在的治疗骨肉瘤的机制之一.
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