【摘 要】
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目的研究尿酸对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)C反应蛋白(CRP)基因和蛋白表达的影响,并初步探讨其氧化应激机制。方法将不同浓度的尿酸(0、4、8、12、16mg/dL)分别与HUVECs共同孵
【机 构】
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川北医学院附属医院风湿免疫研究所,射洪县人民医院检验科,川北医学院附属医院检验科,
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目的研究尿酸对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)C反应蛋白(CRP)基因和蛋白表达的影响,并初步探讨其氧化应激机制。方法将不同浓度的尿酸(0、4、8、12、16mg/dL)分别与HUVECs共同孵育12h,以及将12mg/dL尿酸与HUVECs分别作用不同时间(0、6、12、24、48h)后,采用Real-time PCR检测HUVECs CRP mRNA表达;Western blot检测HUVECs CRP蛋白表达;以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)为荧光探针,用荧光显微镜和流式细胞术检测HUVECs活性氧(ROS)水平,并观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC,10mmol/L)对HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表达的影响。结果 8~16mg/dL尿酸诱导HUVECs CRP mRNA和蛋白表达上调;12mg/dL尿酸与HUVECs作用6h,HUVECs CRP mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),随着时间延长,CRP mRNA和蛋白表达量逐渐增加,至12h达最高峰(P<0.01)。NAC可显著抑制尿酸对HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表达的影响,使CRP mRNA和蛋白表达接近于正常水平。结论尿酸诱导HUVECs CRP表达,其机制可能与尿酸增加HUVECs ROS水平有关,提示尿酸介导的氧化应激和炎症反应可能与内皮细胞的损伤有关。
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