高效液相色谱法同时测定发酵液中赤藓糖醇和L-赤藓酮糖的含量

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建立了采用高效液相色谱(HPLC)同时测定发酵液中底物赤藓糖醇和产物L-赤藓酮糖含量的方法。采用Lichrospher 5-NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm),柱温30℃,以乙腈-水(体积比为9∶1)为流动相,流速1.0mL/min。用示差折光检测器检测赤藓糖醇,检测器温度为35℃。用紫外检测器在室温下检测L-赤藓酮糖,检测波长为277nm。所得赤藓糖醇的线性范围为1.00~100.00g/L,相关系数为0.998 5,检出限为0.10g/L,定量限为0.45g/L;所得L-赤藓酮糖的线性范围为1.00~100.00g/L,相关系数为0.995 8,检出限为0.50g/L,定量限为0.87g/L;赤藓糖醇的日内和日间相对标准偏差(RSD)分别小于3.28%和5.30%,L-赤藓酮糖的日内和日间RSD分别小于2.16%和2.25%;回收率均大于99%。取不同时间的发酵液样品分别用上述方法测定,结果表明所建立的HPLC法不受发酵液中其他组分的影响,可同时测定底物赤藓糖醇和产物L-赤藓酮糖的含量。
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