【摘 要】
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目的 研究人胚胎干细胞(hESC)分别经自发分化和诱导分化产生的视网膜色素上皮细胞(RPE)表达及分泌补体替代通路调控蛋白补体H因子(CFH)的情况.方法 将hESC分别按照临床试验中
【机 构】
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四川大学华西医院眼科,成都,610041
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目的 研究人胚胎干细胞(hESC)分别经自发分化和诱导分化产生的视网膜色素上皮细胞(RPE)表达及分泌补体替代通路调控蛋白补体H因子(CFH)的情况.方法 将hESC分别按照临床试验中所采用的自发分化法和利用生长因子与小分子药物诱导分化的方法获得hESC-RPE,在第3代hESC-RPE培养至第4～5周后,采用实时荧光定量PCR和免疫荧光进行鉴定,酶联免疫吸附(ELISA)法检测CFH的分泌水平.对照组为ARPE-19细胞系.结果 hESC通过自发分化和诱导分化均可获得在细胞形态及特异性基因表达方面与人原代RPE高度相似的细胞.自发分化产生的视网膜色素上皮细胞(sdRPE)和诱导分化产生的视网膜色素上皮细胞(iRPE)的CFH mRNA相对表达量均高于对照组ARPE-19细胞系(P＜0.05).在24 h、48 h和72 h的条件培养基中,sdRPE组的CFH分泌量高于iRPE组(P=0.000 2),且sdRPE和iRPE均高于ARPE-19细胞系(P＜0.000 1).结论 两种分化方式来源的hESC-RPE均可表达并分泌CFH,提示hESC-RPE可能具有一定的调控补体替代通路的能力.
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