miR-597在肝细胞性肝癌中表达及其对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响与机制

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目的 观察肝细胞性肝癌(HCC)组织及细胞系中miR-597的表达情况,以及上调miR-597表达对HCC癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用机制.方法 选择20例HCC患者,其中男性12例,女性8例;年龄21~69岁,中位年龄46岁;临床分期T1N0M0期10例,T2N0M0期3例,T3N0M0期3例,T4N0M0期4例;14例有乙型肝炎病史,1例有乙型肝炎、丙型肝炎重叠感染史,5例无肝炎病史.取癌组织及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测其miR-597 mRNA表达水平.采用RT-qPCR检测不同肝癌细胞系及正常肝上皮细胞中miR-597mRNA表达水平.将体外传代培养人HCC细胞系Hep3B,分为对照组和miR-597过表达组,分别转染对照(miR-NC)及miR-597模拟物(miR-597 mimics),用RT-qPCR检测细胞中miR-597 mRNA表达水平;用MTT实验检测Hep3B细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测Hep3B细胞的迁移和侵袭能力;荧光素酶报告实验确定FOSL2是否是miR-597的靶基因;通过Western blot实验检测Hep3B细胞FOSL2蛋白的表达水平.采用RT-qPCR检测癌组织及对应的癌旁组织中FOSL2 mRNA表达水平,分析miR-597与FOSL2表达的相关性.结果 HCC组织中miR-597 mRNA表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01).HCC细胞系中miR-597 mRNA表达水平明显低于肝正常上皮细胞(P<0.05).miR-597过表达组miR-597 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著低于对照组(P<0.05).miR-597直接靶定FOSL2的3'非翻译区(3'-UTR),同时miR-597过表达组FOSL2蛋白的表达水平相对于对照组明显降低(P<0.05),HCC组织中FOSL2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01),且FOSL2与miR-597的表达呈显著负相关(r=-0.784,P<0.001).结论 miR-597在HCC组织中低表达而FOSL2高表达,上调miR-597的表达能够抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调FOSL2蛋白的表达有关.
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