CRISPR/Cas 9系统构建敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系研究

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：poppytao

【摘要】

：

目的利用CRISPR/Cas 9系统在人卵巢癌细胞系OVCAR3中构建敲除纤维连接蛋白(FN)表达的稳定表达细胞系。方法检测4株卵巢癌细胞系FN表达情况。使用E-CRISP网站设计针对FN基因的

【作者】

：

霍茜瑜邵艳宏程优刘亚珊李雪刘运德鲍会静

【机构】

：

天津医科大学医学技术学院,天津医科大学朱宪彝纪念医院,天津市南开医院精准整合医学实验室

【出处】

：

重庆医学

【发表日期】

：

2020年11期

【关键词】

：

卵巢肿瘤纤维连接蛋白基因敲除技术 CRISPR/Cas 9 ovarian neoplasmsfibronectingene knockout techni

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目的利用CRISPR/Cas 9系统在人卵巢癌细胞系OVCAR3中构建敲除纤维连接蛋白(FN)表达的稳定表达细胞系。方法检测4株卵巢癌细胞系FN表达情况。使用E-CRISP网站设计针对FN基因的向导RNA(sgRNA)序列,将序列连接到lenti-CRISPR-V2质粒后转染高表达FN的OVCAR3细胞。鉴定构建的细胞系FN表达情况。结果在4株细胞系中选择高表达FN的OVCAR3细胞转入测序结果正确的lenti-CRISPR-V2-FN-sgRNA重组质粒,q-PCR和Western blot方法验证结果

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