流式细胞仪检测胰蛋白酶对烟曲霉分生孢子表面纤连蛋白受体黏附力的影响

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目的测定胰蛋白酶对真菌细胞活力的影响,探讨胰蛋白酶对烟曲霉分生孢子表面纤连蛋白受体的影响。方法用检测胰蛋白酶预处理20min后烟曲霉分生孢子的活力,检测纤连蛋白与烟曲霉分生孢子的黏附率及胰蛋白酶处理后分生孢子与纤连蛋白的黏附率的变化,同时应用激光共聚焦显微镜观察分生孢子表面纤连蛋白受体的分布情况。结果胰蛋白酶预处理的分生孢子无凋亡峰出现,被干预的分生孢子接种于马铃薯培养基后仍有大量烟曲霉生长;分生孢子与纤连蛋白的黏附作用有特异性和饱和性;定量的纤连蛋白与被干预的分生孢子的黏附率随胰蛋白酶浓度的增加而降低;干预后分生孢子表面荧光标记的纤连蛋白受体分布下降。结论蛋白水解酶类可降解真菌细胞表面相关蛋白受体;流式细胞术可成为检测真菌细胞表面微观变化的高效辅助手段之一。
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