大鼠肠缺血再灌注时肠组织微小RNA表达的变化

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目的

探讨大鼠肠缺血再灌注时肠组织微小RNA(miRNA)表达的变化。

方法

成年雄性SD大鼠12只,体重230~250 g,采用随机数字表法分为2组(n=6):假手术组(S组)和缺血再灌注组(I/R组)。采用阻断肠系膜上动脉60 mim再灌注120 min的方法制备肠缺血再灌注损伤模型。再灌注结束后观察小肠组织病理学结果,行Chiu评分,测定小肠含水率和肠黏膜组织乳酸含量。对肠黏膜组织进行miRNA表达谱芯片分析,采用qRT-PCR法验证差异表达的miRNA。另取成年雄性SD大鼠24只,体重230~250 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):miR-378抑制剂组(An组)、miR-378激动剂组(Ag组)、抑制剂对照组(AnC组)和激动剂对照组(AgC组)分别经尾静脉注射miR-378抑制剂antagomir、激动剂agomir、antagomir阴性对照、agomir阴性对照溶液100 μl(10 nmol/ml),24 h后制备肠缺血再灌注损伤模型。再灌注结束后观察小肠组织病理学结果,并行Chiu评分,测定肠含水率和小肠黏膜乳酸含量。

结果

与S组比较,其余5组Chiu评分、肠含水率和肠黏膜乳酸含量升高(P<0.01)。与I/R组比较,An组Chiu评分、肠含水率和肠黏膜乳酸含量升高,Ag组上述指标降低(P<0.05),AnC组及AgC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。An组肠组织病理学损伤较I/R组加重,Ag组肠组织病理学损伤较I/R组减轻。miRNA芯片分析共筛选出19个差异表达的miRNA,其中miR-292-3p表达上调,包括miR-378在内的18个miRNA表达下调(P<0.05)。qRT-PCR验证9个miRNA表达下调(P<0.05或0.01),与芯片分析结果一致。

结论

大鼠肠缺血再灌注时肠组织有19个miRNA表达发生变化,且明确miR-378表达下调与大鼠肠缺血再灌注损伤有关。

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