【摘 要】
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应用免疫亲和层析法纯化的正常胎儿组织中的甲胎蛋白(AFP)为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0采取淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,经有限稀释法进行四代克隆
【机 构】
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河南省医学科学研究所,河南省医学科学研究所,河南省医学科学研究所,
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应用免疫亲和层析法纯化的正常胎儿组织中的甲胎蛋白(AFP)为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0采取淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,经有限稀释法进行四代克隆化后。获得十株稳定分泌抗人AFP单克隆抗体杂交瘤细胞株。其细胞培养上清中AFP单抗滴度为1:160～640,诱生同系小鼠腹水中单抗滴度为1:4000～100,000。特异性中和抑制试验显示单抗是针对AFP的。放射免疫分析示某些单抗具有较强的亲和力。杂交瘤细胞染色体数目为100～110,其分泌的抗体分别属于IgG_(2a)、IgG_1和IgM型。
BALB / c mice were immunized with AFP in normal fetal tissues purified by immunoaffinity chromatography and their spleen cells were fused with mouse myeloma cells SP2 / 0 using lymphocyte hybridoma , After four generations of cloning by limiting dilution method. Ten stable monoclonal antibody secreting anti-human AFP hybridoma cell lines were obtained. The cell culture supernatant AFP monoclonal antibody titer of 1: 160 ~ 640, induced homologous mouse ascites monoclonal antibody titer of 1: 4000 to 100,000. Specific neutralization inhibition assays showed that the mAb was directed against AFP. Radioimmunoassay showed that some mAbs have strong affinity. Hybridoma cell chromosome number of 100 to 110, the secretion of antibodies belong to IgG_ (2a), IgG_1 and IgM type.
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