【摘 要】
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目的:探讨CD40-CD40配体（CD40L）相互作用是否能激活人外周血单核细胞（PBMC）内二酰基甘油（DAG）-蛋白激酶C（PKC）信号通路。方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、薄层层析和放射自显影方
【机 构】
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东南大学附属中大医院心内科,第二军医大学长征医院心内科,第二军医大学长征医院心内科,第二军医大学长征医院心内科,第二军医大学长征医院心内科 南京 210009,上海 200003 中国,上海 2000
【出 处】
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Acta Pharmacologica Sinica
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目的:探讨CD40-CD40配体（CD40L）相互作用是否能激活人外周血单核细胞（PBMC）内二酰基甘油（DAG）-蛋白激酶C（PKC）信号通路。方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、薄层层析和放射自显影方法检测,细胞PKC活性及胞内游离钙分别采用[Υ32P]ATP磷酸转移法和Fluo-3荧光负载流式细胞术检测。结果:CD40L以剂量依赖方式刺激人外周血单核细胞合成DAG,并具有双时限性变化,第一峰值在20s,第二峰值在10min时出现,然后DAG水平缓慢下降,至少持续20-30min,单核细胞蛋白激酶C总活性受CD40L刺激后明显增加,峰值在12min,持续20min以上,并且这种作用主要是胞浆PKC活性向胞膜PKC活性转位所致,CD40L能刺激胞内游离Ca2+出现短暂的快速升高,继之为持续阶段,移去细胞外Ca2+,胞内快速阶段无影响,而持续阶段明显受到抑制,抗CD40抗体能显著抑制CD40L引起的胞内DAGPKC信号通路激活及[Ca2+]i的动态变化。结论:CD40-CD40L相互作用能激活人外周血单核细胞[Ca2+]i动态变化及二酰基甘油-蛋白激酶C信号通路。
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