【摘 要】
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选择质粒保有率高及最适合发酵的TOP10菌株，在传统的煮沸裂解法提取质粒的基础上进行了提取方法的改进，使用恒流泵和热交换螺旋管，使菌体在流动过程中完成热裂解，释放质粒DNA。改
【机 构】
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新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室,中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2003AA241110和No.2004AA213102);国家自然科学基金项目(No.30271220)资助
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选择质粒保有率高及最适合发酵的TOP10菌株，在传统的煮沸裂解法提取质粒的基础上进行了提取方法的改进，使用恒流泵和热交换螺旋管，使菌体在流动过程中完成热裂解，释放质粒DNA。改进后的方法裂解温度可降到70℃，提取工艺流程简单，缩短了提取时间，提高了质粒DNA的提取效率。利用本方法提取的质粒大小正确、纯度合格，每升发酵液得率平均为100mg质粒DNA。
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