【摘 要】
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由于抗生素的大量使用和滥用,肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）出现了耐药性,甚至是多重耐药性,因此开发新的抗生素和疫苗迫在眉睫。为深入了解肺炎链球菌的耐药机制,从而
【机 构】
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黄山学院生命与环境科学学院; 中国科学技术大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.31400628);安徽省教育厅质量工程项目(No.2015sjjd022);黄山学院自然科学研究项目(No.2016xkjq005);国家大学生创新创业项目(No.201710375004和No.201710375022)
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由于抗生素的大量使用和滥用,肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）出现了耐药性,甚至是多重耐药性,因此开发新的抗生素和疫苗迫在眉睫。为深入了解肺炎链球菌的耐药机制,从而为开发新的抗生素和疫苗提供依据,本研究从肺炎链球菌TIGR4菌株中克隆1个耐药相关基因SP0010（Gen Bank登录号:A0A0H2UMY6-1）至表达载体p ET28a（+）中,并转化至大肠杆菌（Escherichia coli）Rosetta（DE3）菌株,实现基因SP0010的异源表达。通过蛋白电泳结果显示,该重组蛋白Sp0010的最佳诱导温度为16?C;镍柱纯化条件为20 mmol/L咪唑除杂蛋白,250 mmol/L咪唑洗脱重组蛋白。亲和层析后的重组蛋白Sp0010在溶液状态为单体,且纯度较高;而肽聚糖结合实验揭示重组蛋白Sp0010能结合肽聚糖,且与去磷壁酸的肽聚糖结合能力更强。该研究揭示了蛋白Sp0010与肺炎链球菌肽聚糖代谢相关,为后续阐明其在肺炎链球菌耐药机制的作用提供了数据支持。
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