健脾软肝方对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞失窗孔的影响

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目的:探讨健脾软肝方对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞失窗孔的影响。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,采用2 m L/kg的30%CCL4与70%橄榄油混合液腹腔注射,2次/周,复制肝纤维化模型。造模同时给予药物干预,正常组和模型组均给予生理盐水灌胃,阳性对照组用扶正化瘀方灌胃,健脾软肝方高、中、低剂量组分别给予不同剂量的健脾软肝方灌胃。4周后,采用HE染色和Mallory染色观察肝组织纤维化程度,透射电镜观察肝窦内皮细胞窗孔变化,ELISA法检测血清HA含量、Real-time PCR及免疫组化ABC法检测CD31、CD44mRNA及蛋白表达。结果:健脾软肝方干预后,光镜显示肝纤维化程度比模型组减轻;电镜显示大鼠肝窦内皮细胞窗孔直径变大、数目增多;HA含量降低(P<0.01),且高、中、低剂量组血清HA的降低随剂量的升高而变化,表现为一定的剂量依赖关系;CD44阳性及mRNA表达增高(P<0.05),CD31阳性及mRNA表达降低(P<0.05),且表达量随剂量的升高而逐渐降低,呈一定的剂量依赖关系。结论:健脾软肝方可减轻肝纤维化大鼠LSEC失窗孔的作用。
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