论文部分内容阅读
1 洗涤红细胞的制备
1.1 洗涤红细胞的概念：洗涤红细胞(WRC)是外科常用的成分输血制品，是健康血液除去全部血浆和90%白细胞及血小板，临床用于因多次输血而产生白细胞抗体的贫血病人，以及器官移植病人，减少排斥反应。
1.2 洗涤红细胞的特点：一般手工洗涤红细胞可以去除红细胞中80%～90%的白细胞和98%以上的血浆蛋白，使用使用机器洗涤后的红细胞中，白细胞减至5×108/L以下，几乎不含任何血浆蛋白。
1.3 制备方法:
1.3.1 封闭式三联盐水袋洗涤法三联盐水袋为3个容积为350～400ml单袋用塑料管道相连的密闭无菌、无热源系统。每袋内装有200ml注射用生理盐水，主袋连接穿刺针头1个。三个袋子之间用塑料夹子夹住，彼此不相连。⑴保存期内的悬浮红细胞、浓缩红细胞或全血均可以用作洗涤红细胞的原料细胞。⑵将三联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内，把主袋内200ml盐水加入红细胞袋内，充分混匀后，倒流入三联袋主袋内。⑶四个袋子分别装于2个离心套桶中平衡后，对称放入离心机内，在22℃±2℃以4500×g的离心力离心3分钟。⑷离心后将装有血液的血袋悬挂于支架上，把上清和白膜分入空袋内，热合切断与废液相连的塑料管，弃去废液袋。⑸重复⑵⑶⑷步骤，依次洗涤红细胞3次。⑹洗涤红细胞制品在三联袋的末袋内，将与末袋相连的塑料管内充满红细胞，分段热合留样本，用以临床鉴定血型和交叉配型。
1.3.2 开放式洗涤法若无三联盐水袋装置，可以用普通医用生理盐水，在百级超净台内连接洗涤或用无菌连接装置在普通工作间连接洗涤。⑴同封闭式三联盐水袋洗涤法中⑴的要求。⑵在超净台上用无菌操作将生理盐水加入被洗涤的红细胞袋内，混匀。⑶在22℃±2℃以1160×g的离心力离心8分钟。⑷在超净台上将上清液及白膜分入废液袋中，再加入生理盐水并混匀。⑸在4℃±2℃以5000×g的离心力离心6分钟。⑹如此重复⑷⑸步骤常规反复洗涤3次，国内有报告洗涤4～6次，最后一次分出上清液和白膜后，在洗涤红细胞制品中加入红细胞量一半的生理盐水，配制成约为70%比积的红细胞悬液。
1.3.3 机器洗涤法国外普遍应用机器洗涤红细胞,洗涤红细胞的机型很多,例如细胞处理机等。洗涤效果优于手工洗涤，但价格昂贵，国内目前使用较少。
1.3.4 潍坊市红十字中心血站现采用封闭式四联盐水袋洗涤法,四联盐水袋每袋容积约为165ml,袋内装有注射用生理盐水,用无菌接管机连接进行洗涤。现使用的离心机型号为贺利氏6000i，主要以少白红细胞、少白全血作为洗涤红细胞原料细胞。
1.3.5 洗涤红细胞的质量要求，肉眼观察外观应无凝块、溶血、气泡，上清液应澄清透明。血袋无破损，采血袋上保留至少20cm长注满全血的分段热合的采血管。200ml全血分离的洗涤红细胞容量应为125ml±10%，400ml全血分离的洗涤红细胞容量应为250ml±10%。红细胞回收率≥70%，血浆蛋白清除率≥98%，白细胞清除率≥80%。
2 洗涤红细胞的应用
2.1 洗涤红细胞的主要适应症：⑴输入全血或血浆后发生过敏反应（荨麻疹、血管神经性水肿、过敏性休克等）的患者。⑵自身免疫性溶血性贫血患者和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输血的患者。⑶高钾血症及肝、肾功能障碍需要输血的患者。⑷由于反复输血已产生白细胞或血小板抗体引起输血发热反应的患者。⑸新生儿溶血病患儿未达到换血指征时的成分输血。⑹缺乏同型血时，进行不同型红细胞相容性输注的患者，例如AB型RhD阴性患者在缺乏同型血时，可选择A型、B型或O型RhD阴性的洗涤红细胞输住，要求交叉配血进行主侧相合。
2.2 洗涤红细胞的临床应用效果：举例：应用洗涤红细胞治疗50例贫血病人，另一同病种病人38例输全血（剂量与洗涤红细胞相当）治疗后，比较两组红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（HCT）的结果变化，结果应用洗涤红细胞治疗后的50例贫血病人其RBC、Hb、HCT水平明显高于输全血治疗后的38例贫血病人。结论应用洗涤红细胞治疗贫血病人，尤其是治疗自身免疫性溶血性贫血病人，疗效确切。
2.3 潍坊市红十字中心血站洗涤红细胞用量与悬浮少白红细胞用量对比分析。
表1 2008年至2010年潍坊部分医院洗涤红细胞用量情况
医院名称 洗涤红细胞用量（单位）占全部医院总用量百分比(%) 第几位
潍坊市人民医院 49924.221
潍坊市第二人民医院31415.242
坊子区人民医院1668.063
寿光市人民医院1597.724
潍坊市中医院1587.675
潍坊市附属医院964.666
解放军第89医院854.137
昌乐县人民医院753.648
昌邑市人民医院68 3.39
诸城市中医院401.9410
益都中心医院361.7511
诸城市人民医院321.5512
安丘市人民医院281.3613
昌乐县中医院281.3613
临朐县人民医院221.0714
青州市人民医院221.0714
潍坊市脑科医院200.9715
安丘市中医院200.9715
潍坊市市立医院100.4916
高密市人民医院60.2917
安丘市白求恩医院60.2917
潍坊市肿瘤医院50.2418
寒亭区人民医院20.119
市人民医院海化分院20.119
寿光中医院00 20
备注:2008年至2010年潍坊全部医院洗涤红细胞总用量为2060单位
表2 2008年至2010年潍坊部分医院悬浮少白红细胞用量情况
医院名称 悬浮少白红细胞用量(单位)占全部医院总用量百分比(%)第几位
解放军第89医院32835.510.81
潍坊市人民医院27588.69.082
诸城市人民医院25247.98.313
高密市人民医院25099.38.264
益都中心医院21386.97.045
寿光市人民医院18276.46.016
临朐县人民医院18110.45.967
安丘市人民医院133474.398
青州市人民医院11696.33.859
潍坊市中医院11169.53.6710
昌邑市人民医院9552.63.1411
昌乐县人民医院8861.52.9212
安丘市中医院80402.6513
坊子区人民医院6662.52.1914
潍坊市第二人民医院6428.52.1115
寿光中医院6073.5216
潍坊市附属医院5818.91.9117
潍坊市脑科医院5820.51.9117
昌乐县中医院47771.5718
潍坊市市立医院4583.51.5119
寒亭区人民医院4558.51.5020
诸城市中医院43281.4221
安丘市白求恩医院22160.7322
潍坊市肿瘤医院1576.50.5223
市人民医院海化分院15140.5024
备注:2008年至2010年潍坊全部医院悬浮少白红细胞总用量为303978.7单位
表3 2008年至2010年潍坊部分医院洗涤红细胞用量占悬浮少白红细胞用量情况百分比
医院名称洗涤红细胞用量(单位)悬浮少白红细胞用量(单位)洗涤红细胞占悬浮少白红细胞百分比(%)第几位
潍坊市第二人民医院3146428.54.881
坊子区人民医院1666662.52.492
潍坊市人民医院49927588.61.813
潍坊市附属医院965818.91.654
潍坊中医院15811169.51.415
诸城中医院4063280.926
寿光市人民医院15918276.40.877
昌乐县人民医院758861.50.858
昌邑市人民医院689552.60.719
昌乐县中医院2847770.5910
潍坊市脑科医院205820.50.3411
潍坊市肿瘤医院51576.50.3212
安丘市白求恩医院622160.2713
解放军第89医院8532835.50.2614
安丘市中医院2080400.2515
潍坊市市立医院104583.50.2216
安丘市人民医院2813347 0.2117
青州市人民医院2211696.30.1918
益都中心医院3621386.90.1719
诸城市人民医院3225247.90.1320
市人民医院海化分院215140.1320
临朐县人民医院2218110.40.1221
寒亭区人民医院24558.50.0422
高密市人民医院625099.30.0223
寿光中医院06073.5024
表4 2008年至2010年潍坊全部医院洗涤红细胞总用量分血型对比
洗涤红细胞用量（单位）总用量（单位）占总用量百分比%第几位
B型73535.781
A型580206028.162
O型56027.183
AB型1838.884
表5 2008年至2010年潍坊全部医院少白红细胞总用量分血型对比
少白红细胞用量（单位）总用量（单位）占总用量百分比%第几位
B型93318.630.701
O型 92631 303978.7 30.47 2
A型 86452.8 28.44 3
AB型 31576.3 10.39 4
2.4 去白细胞的洗涤红细胞质量探讨:经实验证明过滤白细胞后的悬浮少白红细胞，白细胞几乎全部滤除，血小板和血浆蛋白去除率为98%以上，还去除了大量的细胞碎屑、代谢产物、抗凝剂和微生物，去除白细胞可以防止因患者产生的白细胞抗体与输入的白细胞产生抗原抗体反应，同时可以防止输入的白细胞对患者反复刺激而产生抗体。如果用没有滤白的悬浮红细胞制备洗涤红细胞，洗涤3遍白细胞去除率只在80%以上，临床发现输注这样的洗涤红细胞后仍有发生发热反应的，而用悬浮少白红细胞制备的洗涤红细胞，应用临床后较少发生输血反应，所以对输注洗涤红细胞的患者最好输注经白细胞过滤后制备的洗涤红细胞，这样输血更安全。
2.5 洗涤红细胞的不足：①由于只去除了大部分的白细胞，起不到完全预防HLA同种免疫和亲白细胞病毒感染的作用。②经过反复多次地开放洗涤，增加了血液被微生物污染的机会。③制备过程中会丢失近30%的红细胞，直接影响输注疗效。④洗涤红细胞不能长时间保存，应尽可能在洗涤后6～8小时内输注。⑤制备成本高，时间长，从预约到送达临床至少需要数小时，难以满足急救治疗的需要。
3 建议
潍坊市红十字中心血站血供科的工作人员在电话予约过程中遇到过多种情况，有的医院在予约后，由于各种原因又取消予约，有的没有提前做抗体筛查，已经制备好的洗涤红细胞无法给患者使用，有的医院在掌握洗涤红细胞适应症方面还有待于尽一步提高。
因此临床使用洗涤红细胞时，应严格掌握适应症，避免滥用，最好提前作好抗体筛查，做到安全、科学、合理用血。
4 洗涤红细胞的发展现状
为了解决现有洗涤红细胞密闭性差以及保存时间短等问题，国内部分血站发明提供一种密闭方式集采血与洗涤于一体，洗涤后增加红细胞保存时间，减少在洗涤过程中污染的Map红细胞洗涤方法，其步骤是：首先将血液置于母袋中CPD液中，分离，将上层血浆移至空袋，将导管密封，血浆备用；再将第三袋中Map液移至母袋中，混匀，进行第一次洗涤；将第四袋一部分Map液移至母袋中，混匀，进行第二次洗涤；重复操作，进行第三次洗涤；将第四袋中剩余的Map液全部移至母袋中，密封，断掉第三，四袋，将母袋中红细胞与Map液混匀即可，此项发明是在密闭的洗涤袋中进行进行洗涤，集采血与洗涤于一体，使用方便，安全，在4℃±2℃保存30天。
参考文献
[1] 王培华《输血技术学》1998年6月
[2] 王军海《 实用医技杂志 》2008年3月15卷9期
[3] 梁芬《 中国航天医药杂志 》2004年6卷2期
作者单位：261041 潍坊市红十字中心血站
1.1 洗涤红细胞的概念：洗涤红细胞(WRC)是外科常用的成分输血制品，是健康血液除去全部血浆和90%白细胞及血小板，临床用于因多次输血而产生白细胞抗体的贫血病人，以及器官移植病人，减少排斥反应。
1.2 洗涤红细胞的特点：一般手工洗涤红细胞可以去除红细胞中80%～90%的白细胞和98%以上的血浆蛋白，使用使用机器洗涤后的红细胞中，白细胞减至5×108/L以下，几乎不含任何血浆蛋白。
1.3 制备方法:
1.3.1 封闭式三联盐水袋洗涤法三联盐水袋为3个容积为350～400ml单袋用塑料管道相连的密闭无菌、无热源系统。每袋内装有200ml注射用生理盐水，主袋连接穿刺针头1个。三个袋子之间用塑料夹子夹住，彼此不相连。⑴保存期内的悬浮红细胞、浓缩红细胞或全血均可以用作洗涤红细胞的原料细胞。⑵将三联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内，把主袋内200ml盐水加入红细胞袋内，充分混匀后，倒流入三联袋主袋内。⑶四个袋子分别装于2个离心套桶中平衡后，对称放入离心机内，在22℃±2℃以4500×g的离心力离心3分钟。⑷离心后将装有血液的血袋悬挂于支架上，把上清和白膜分入空袋内，热合切断与废液相连的塑料管，弃去废液袋。⑸重复⑵⑶⑷步骤，依次洗涤红细胞3次。⑹洗涤红细胞制品在三联袋的末袋内，将与末袋相连的塑料管内充满红细胞，分段热合留样本，用以临床鉴定血型和交叉配型。
1.3.2 开放式洗涤法若无三联盐水袋装置，可以用普通医用生理盐水，在百级超净台内连接洗涤或用无菌连接装置在普通工作间连接洗涤。⑴同封闭式三联盐水袋洗涤法中⑴的要求。⑵在超净台上用无菌操作将生理盐水加入被洗涤的红细胞袋内，混匀。⑶在22℃±2℃以1160×g的离心力离心8分钟。⑷在超净台上将上清液及白膜分入废液袋中，再加入生理盐水并混匀。⑸在4℃±2℃以5000×g的离心力离心6分钟。⑹如此重复⑷⑸步骤常规反复洗涤3次，国内有报告洗涤4～6次，最后一次分出上清液和白膜后，在洗涤红细胞制品中加入红细胞量一半的生理盐水，配制成约为70%比积的红细胞悬液。
1.3.3 机器洗涤法国外普遍应用机器洗涤红细胞,洗涤红细胞的机型很多,例如细胞处理机等。洗涤效果优于手工洗涤，但价格昂贵，国内目前使用较少。
1.3.4 潍坊市红十字中心血站现采用封闭式四联盐水袋洗涤法,四联盐水袋每袋容积约为165ml,袋内装有注射用生理盐水,用无菌接管机连接进行洗涤。现使用的离心机型号为贺利氏6000i，主要以少白红细胞、少白全血作为洗涤红细胞原料细胞。
1.3.5 洗涤红细胞的质量要求，肉眼观察外观应无凝块、溶血、气泡，上清液应澄清透明。血袋无破损，采血袋上保留至少20cm长注满全血的分段热合的采血管。200ml全血分离的洗涤红细胞容量应为125ml±10%，400ml全血分离的洗涤红细胞容量应为250ml±10%。红细胞回收率≥70%，血浆蛋白清除率≥98%，白细胞清除率≥80%。
2 洗涤红细胞的应用
2.1 洗涤红细胞的主要适应症：⑴输入全血或血浆后发生过敏反应（荨麻疹、血管神经性水肿、过敏性休克等）的患者。⑵自身免疫性溶血性贫血患者和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输血的患者。⑶高钾血症及肝、肾功能障碍需要输血的患者。⑷由于反复输血已产生白细胞或血小板抗体引起输血发热反应的患者。⑸新生儿溶血病患儿未达到换血指征时的成分输血。⑹缺乏同型血时，进行不同型红细胞相容性输注的患者，例如AB型RhD阴性患者在缺乏同型血时，可选择A型、B型或O型RhD阴性的洗涤红细胞输住，要求交叉配血进行主侧相合。
2.2 洗涤红细胞的临床应用效果：举例：应用洗涤红细胞治疗50例贫血病人，另一同病种病人38例输全血（剂量与洗涤红细胞相当）治疗后，比较两组红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（HCT）的结果变化，结果应用洗涤红细胞治疗后的50例贫血病人其RBC、Hb、HCT水平明显高于输全血治疗后的38例贫血病人。结论应用洗涤红细胞治疗贫血病人，尤其是治疗自身免疫性溶血性贫血病人，疗效确切。
2.3 潍坊市红十字中心血站洗涤红细胞用量与悬浮少白红细胞用量对比分析。
表1 2008年至2010年潍坊部分医院洗涤红细胞用量情况
医院名称 洗涤红细胞用量（单位）占全部医院总用量百分比(%) 第几位
潍坊市人民医院 49924.221
潍坊市第二人民医院31415.242
坊子区人民医院1668.063
寿光市人民医院1597.724
潍坊市中医院1587.675
潍坊市附属医院964.666
解放军第89医院854.137
昌乐县人民医院753.648
昌邑市人民医院68 3.39
诸城市中医院401.9410
益都中心医院361.7511
诸城市人民医院321.5512
安丘市人民医院281.3613
昌乐县中医院281.3613
临朐县人民医院221.0714
青州市人民医院221.0714
潍坊市脑科医院200.9715
安丘市中医院200.9715
潍坊市市立医院100.4916
高密市人民医院60.2917
安丘市白求恩医院60.2917
潍坊市肿瘤医院50.2418
寒亭区人民医院20.119
市人民医院海化分院20.119
寿光中医院00 20
备注:2008年至2010年潍坊全部医院洗涤红细胞总用量为2060单位
表2 2008年至2010年潍坊部分医院悬浮少白红细胞用量情况
医院名称 悬浮少白红细胞用量(单位)占全部医院总用量百分比(%)第几位
解放军第89医院32835.510.81
潍坊市人民医院27588.69.082
诸城市人民医院25247.98.313
高密市人民医院25099.38.264
益都中心医院21386.97.045
寿光市人民医院18276.46.016
临朐县人民医院18110.45.967
安丘市人民医院133474.398
青州市人民医院11696.33.859
潍坊市中医院11169.53.6710
昌邑市人民医院9552.63.1411
昌乐县人民医院8861.52.9212
安丘市中医院80402.6513
坊子区人民医院6662.52.1914
潍坊市第二人民医院6428.52.1115
寿光中医院6073.5216
潍坊市附属医院5818.91.9117
潍坊市脑科医院5820.51.9117
昌乐县中医院47771.5718
潍坊市市立医院4583.51.5119
寒亭区人民医院4558.51.5020
诸城市中医院43281.4221
安丘市白求恩医院22160.7322
潍坊市肿瘤医院1576.50.5223
市人民医院海化分院15140.5024
备注:2008年至2010年潍坊全部医院悬浮少白红细胞总用量为303978.7单位
表3 2008年至2010年潍坊部分医院洗涤红细胞用量占悬浮少白红细胞用量情况百分比
医院名称洗涤红细胞用量(单位)悬浮少白红细胞用量(单位)洗涤红细胞占悬浮少白红细胞百分比(%)第几位
潍坊市第二人民医院3146428.54.881
坊子区人民医院1666662.52.492
潍坊市人民医院49927588.61.813
潍坊市附属医院965818.91.654
潍坊中医院15811169.51.415
诸城中医院4063280.926
寿光市人民医院15918276.40.877
昌乐县人民医院758861.50.858
昌邑市人民医院689552.60.719
昌乐县中医院2847770.5910
潍坊市脑科医院205820.50.3411
潍坊市肿瘤医院51576.50.3212
安丘市白求恩医院622160.2713
解放军第89医院8532835.50.2614
安丘市中医院2080400.2515
潍坊市市立医院104583.50.2216
安丘市人民医院2813347 0.2117
青州市人民医院2211696.30.1918
益都中心医院3621386.90.1719
诸城市人民医院3225247.90.1320
市人民医院海化分院215140.1320
临朐县人民医院2218110.40.1221
寒亭区人民医院24558.50.0422
高密市人民医院625099.30.0223
寿光中医院06073.5024
表4 2008年至2010年潍坊全部医院洗涤红细胞总用量分血型对比
洗涤红细胞用量（单位）总用量（单位）占总用量百分比%第几位
B型73535.781
A型580206028.162
O型56027.183
AB型1838.884
表5 2008年至2010年潍坊全部医院少白红细胞总用量分血型对比
少白红细胞用量（单位）总用量（单位）占总用量百分比%第几位
B型93318.630.701
O型 92631 303978.7 30.47 2
A型 86452.8 28.44 3
AB型 31576.3 10.39 4
2.4 去白细胞的洗涤红细胞质量探讨:经实验证明过滤白细胞后的悬浮少白红细胞，白细胞几乎全部滤除，血小板和血浆蛋白去除率为98%以上，还去除了大量的细胞碎屑、代谢产物、抗凝剂和微生物，去除白细胞可以防止因患者产生的白细胞抗体与输入的白细胞产生抗原抗体反应，同时可以防止输入的白细胞对患者反复刺激而产生抗体。如果用没有滤白的悬浮红细胞制备洗涤红细胞，洗涤3遍白细胞去除率只在80%以上，临床发现输注这样的洗涤红细胞后仍有发生发热反应的，而用悬浮少白红细胞制备的洗涤红细胞，应用临床后较少发生输血反应，所以对输注洗涤红细胞的患者最好输注经白细胞过滤后制备的洗涤红细胞，这样输血更安全。
2.5 洗涤红细胞的不足：①由于只去除了大部分的白细胞，起不到完全预防HLA同种免疫和亲白细胞病毒感染的作用。②经过反复多次地开放洗涤，增加了血液被微生物污染的机会。③制备过程中会丢失近30%的红细胞，直接影响输注疗效。④洗涤红细胞不能长时间保存，应尽可能在洗涤后6～8小时内输注。⑤制备成本高，时间长，从预约到送达临床至少需要数小时，难以满足急救治疗的需要。
3 建议
潍坊市红十字中心血站血供科的工作人员在电话予约过程中遇到过多种情况，有的医院在予约后，由于各种原因又取消予约，有的没有提前做抗体筛查，已经制备好的洗涤红细胞无法给患者使用，有的医院在掌握洗涤红细胞适应症方面还有待于尽一步提高。
因此临床使用洗涤红细胞时，应严格掌握适应症，避免滥用，最好提前作好抗体筛查，做到安全、科学、合理用血。
4 洗涤红细胞的发展现状
为了解决现有洗涤红细胞密闭性差以及保存时间短等问题，国内部分血站发明提供一种密闭方式集采血与洗涤于一体，洗涤后增加红细胞保存时间，减少在洗涤过程中污染的Map红细胞洗涤方法，其步骤是：首先将血液置于母袋中CPD液中，分离，将上层血浆移至空袋，将导管密封，血浆备用；再将第三袋中Map液移至母袋中，混匀，进行第一次洗涤；将第四袋一部分Map液移至母袋中，混匀，进行第二次洗涤；重复操作，进行第三次洗涤；将第四袋中剩余的Map液全部移至母袋中，密封，断掉第三，四袋，将母袋中红细胞与Map液混匀即可，此项发明是在密闭的洗涤袋中进行进行洗涤，集采血与洗涤于一体，使用方便，安全，在4℃±2℃保存30天。
参考文献
[1] 王培华《输血技术学》1998年6月
[2] 王军海《 实用医技杂志 》2008年3月15卷9期
[3] 梁芬《 中国航天医药杂志 》2004年6卷2期
作者单位：261041 潍坊市红十字中心血站