【摘 要】
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目的探究体外诱导M1型大鼠肺泡巨噬细胞对弓形虫感染的影响。方法体外用细菌脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN-γ)诱导大鼠肺泡巨噬细胞极化为M1型,用实时荧光定量PCR方法检测巨噬
【机 构】
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宁夏医科大学总医院医学实验中心,宁夏临床病原微生物重点实验室,西安医学院第一附属医院检验科,宁夏医科大学临床医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(81560333).
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目的探究体外诱导M1型大鼠肺泡巨噬细胞对弓形虫感染的影响。方法体外用细菌脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN-γ)诱导大鼠肺泡巨噬细胞极化为M1型,用实时荧光定量PCR方法检测巨噬细胞极化因子的变化,Western blot检测M1型巨噬细胞标志性蛋白诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的变化,进一步使用扫描电子显微镜技术对诱导效果进行鉴定。M1型巨噬细胞与弓形虫共同培养,Diff染色观察其对弓形虫感染增殖的影响。结果与对照组相比,LPS+IFN-γ刺激后,M1型巨噬细胞中相关因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、iNOS、CXCL10 mRNA、CXCL11 mRNA的相对表达量在6h升高(P<0.01),随后下降。Western blot结果显示,正常NR8383细胞不表达i NOS,LPS+IFN-γ刺激后细胞开始表达iNOS,在24h表达最为明显。扫描电子显微镜下观察到LPS+IFN-γ刺激细胞24h后,细胞表面突触增多、变长,细胞体积变大。正常NR8383细胞、M1型大鼠肺泡巨噬细胞分别与弓形虫进行共培养24h,Diff染色后,正常NR8383细胞内可以看到明显弓形虫增殖,而M1型大鼠肺泡巨噬细胞内几乎观察不到弓形虫。结论 M1型大鼠肺泡巨噬细可以明显抑制弓形虫的感染与增殖。
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