姜黄素抗血管生成和黑色素瘤生长的分子机制探讨

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaocai
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目的:探讨姜黄素(curcumin)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和血管生成以及黑色素瘤B16F10生长的影响。方法:以HUVECs细胞,B16F10细胞和B16F10鸡胚尿囊膜移植瘤组织为研究对象,用不同浓度姜黄素分别作用HUVECs细胞,B16F10细胞和B16F10鸡胚尿囊膜移植瘤组织,MTT法检测姜黄素对HUVECs的增殖抑制率;Hoechst 33258染色法观察HUVECs细胞核的形态学变化;Transwell小室迁移实验考察姜黄素对HUVECs迁移能力的影响;鸡胚尿囊膜(CAM)实验考察姜黄素对体内血管生成的抑制作用;采用Western blot法检测姜黄素对HUVECs细胞血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白和B16F10细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达;采用B16F10鸡胚尿囊膜移植瘤模型分析姜黄素对肿瘤生长的影响,采用免疫组化和Western blot分析姜黄素对瘤组织内VEGFR-2,MMP-2蛋白表达的作用。结果:姜黄素(4~15μmol·L-1)对HUVECs增殖无抑制作用,但姜黄素8,10,15μmol·L-1能抑制VEGF诱导的HUVECs增殖(P<0.05,P<0.01);Hoechst 33258染色结果显示姜黄素抑制VEGF诱导的HUVECs增殖不依赖于诱导HUVECs凋亡;Transwell迁移实验显示姜黄素(8,10,15μmol·L-1)能抑制HUVECs迁移(P<0.05,P<0.01);姜黄素能减少血管数目,抑制体内血管生成,并且抑制HUVECs细胞VEGFR-2蛋白和B1610细胞MMP-2蛋白表达,与空白组比较均具有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。姜黄素(20 mg·L-1)能抑制黑色素瘤B16F10体内生长,免疫组化和Western blot结果显示姜黄素(20 mg·L-1)能抑制瘤组织VEGFR-2和MMP-2蛋白表达(P<0.01)。结论:姜黄素能抑制VEGF诱导的HUVECs增殖、迁移及血管生成,抑制黑色素瘤生长,其机制为抑制VEGFR-2,MMP-2蛋白表达。
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