【摘 要】
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目的制备叶酸与青霉素酰化酶G(PGA)偶联酶并测定其体外催化活性动力学性质,为叶酸导向酶催化前体药物的肿瘤治疗(FDEPT)奠定基础.方法通过双功能偶联剂1-乙基-3-(3-二甲氨基
【机 构】
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华中科技大学同济医学院药学院药物化学系
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目的制备叶酸与青霉素酰化酶G(PGA)偶联酶并测定其体外催化活性动力学性质,为叶酸导向酶催化前体药物的肿瘤治疗(FDEPT)奠定基础.方法通过双功能偶联剂1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)将叶酸与PGA偶联,产物经Sephadex G-25纯化.根据叶酸在363 nm处的摩尔吸收系数计算偶联比.以PDAB法测定偶联酶的催化活性.结果偶联酶的偶联比为3～4;比活约为29.8 U/mg;偶联酶和原酶作用的最适pH均为8.0,最适温度为55 ℃,偶联酶和原酶在pH 5～8的范围内都较稳定,Km
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