【摘 要】
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在以前的研究中,通过蛋白质工程技术获得了三突变体白细胞介素2基因（编码12 5位半胱氨酸→丙氨酸;18位亮氨酸→蛋氨酸;19位亮氨酸→丝氨酸） ,并在毕赤酵母中加以表达。进一步优
【机 构】
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西南师范大学生命科学学院,西南师范大学生命科学学院,重庆大学生物工程学院
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在以前的研究中,通过蛋白质工程技术获得了三突变体白细胞介素2基因（编码12 5位半胱氨酸→丙氨酸;18位亮氨酸→蛋氨酸;19位亮氨酸→丝氨酸） ,并在毕赤酵母中加以表达。进一步优化表达条件,其最适诱导条件:80 %以上的通气,诱导2d ,初始pH6 0 ,甲醇终浓度为1 0 %。在上述条件下表达量占菌体总蛋白的30 %以上,大约2 0 0mg L。建立了一套从毕赤酵母表达上清中分离纯化分泌型表达蛋白IL2的方法,经离心,超滤浓缩,强阳离子交换S柱和分子筛层析得到纯化的突变型和野生型IL2 ;其得率为2 7% ,纯度达电泳纯并且HPLC检测只有一个峰。纯化的突变蛋白对CTLL2细胞具有刺激性;与野生型IL2相比,在各种温度条件下储存的突变蛋白保留有更高的活性;突变型IL2的活力是野生型的4～5倍,具有更高的利用价值。
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