广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆表达及免疫保护作用研究

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wdtt5200

【摘要】

：

目的对广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cystatin）基因进行克隆、原核表达，并对表达产物的免疫保护作用作出初步鉴定。方法将广州管圆线虫cystatin基因克隆入载体pGEX-4T-1中，

【作者】

：

潘智华何蔼程梅李卓雅于彦杰贺华良詹希美

【机构】

：

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,徐州医学院形态学实验室

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2009年6期

【关键词】

：

广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂分子克隆免疫保护 Agiostrongylus cantonensis cystatin molecular clonin

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目的对广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cystatin）基因进行克隆、原核表达，并对表达产物的免疫保护作用作出初步鉴定。方法将广州管圆线虫cystatin基因克隆入载体pGEX-4T-1中，转化大肠杆菌BL21进行诱导表达。用纯化融合蛋白隔周免疫小鼠1次，共3次，设GST免疫及未免疫对照组，末次免疫后1w用广州管圆线虫Ⅲ期幼虫攻击感染，3w后剖杀小鼠，计算减虫率及保护率，并测定小鼠特异性IgG抗体水平变化。结果成功构建了pGEX-4T-1／cystatin重组表达质粒，并在大肠杆菌中得以高效可溶性表达，

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