【摘 要】
：
背景:特定条件下,骨髓间充质干细胞可向成骨细胞、成软骨细胞等细胞分化.但骨髓中间充质干细胞含量极低,体外如何获取、纯化并使其高效快速增殖是组织工程技术应用和推广的前
【机 构】
：
青岛大学医学院附属医院骨科,山东省青岛市,266003青岛大学医学院生理教研室,山东省青岛市,266021;
论文部分内容阅读
背景:特定条件下,骨髓间充质干细胞可向成骨细胞、成软骨细胞等细胞分化.但骨髓中间充质干细胞含量极低,体外如何获取、纯化并使其高效快速增殖是组织工程技术应用和推广的前提.目的:优化获取兔骨髓间充质干细胞并对其进行纯化、鉴定,同时对其生物学性状进行观察.设计、时间和地点:观察性实验,于2005-09/2006-07在同济医学院实验动物中心完成.材料:兔龄2个月雌性新西兰纯种大耳白兔1只,用于间充质干细胞取材及原代培养.方法:采用密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代对抽取的骨髓液进行纯化.首先将培养瓶中的培养液吸出,加PBS后再加入2.5 g/L胰酶约3.0 mL,置于37℃培养箱中,两三分钟后在倒置显微镜下观察细胞形态,当细胞胞质回缩,细胞变瘦长,细胞间隙增大,同时有少量脱肇的圆形细胞时可终止消化,加入含血清的L-DMEM完全培养基即可.按1.0X 108L-1的密度接种到一次性塑料培养瓶中进行培养.主要观察指标:间充质干细胞的形态、超微结构和表面标志物的表达;第1,3,5,8,10代细胞的增殖情况,并绘制出生长曲线.结果:①经密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代方法所得的间充质干细胞很纯,第3代和第5代细胞形态单一,细胞排列具有典型的漩涡状结构.②透射电镜观察显示间充质干细胞核大,以圆形或类圆形为主,胞核比例大,细胞器少,为低分化细胞.③传代培养的间充质干细胞生长曲线呈S型,第1,3,5代细胞增殖能力强,细胞生长旺盛,而第8,10代细胞增殖明显减弱.④所分离培养的细胞表达CD44、CD90,不表达CD34,电镜观察为低分化细胞.结论:分离培养的细胞为间充质干细胞且成分单一,具有干细胞特性,第3代和第5代细胞很纯且其增殖能力强.
其他文献
如何才能做到心不为物役,是我们这期讨论的话题.做完这个专题之后,沉下心来想自己,是否也或多或少的为器物所役使呢我们在这个尘世间,要保持精神自由很不容易,似乎总有挥之不
上海交通大学医学院附属市第一人民医院是全同首家开设“护理专科门诊”的三甲医院。开诊多年来，护理门诊的规范服务受到了患者的极大欢迎，切实满足了患者的需求，获得了极好的社
0 引言rnmiRNAs是能调控其他基因表达的非编码小分子RNA,广泛存在于各种有机体.其主要是通过与目标mRNA的互补配对,指导RISC(RNA-induced silencing cornplex,RISC)在转录后
科学家已经发现，在动物界，寿命与心率快慢相关，即心率快的鼠、兔寿命短，而心率慢的鲸鱼、乌龟寿命长，同样的规律适用于万物之灵的人类。 人类的不同性别，不同年龄，心率有所不同。正常生理状态下，孕期的胎儿心率120～160次/分，通常女性比男性心率稍快，年龄越小越快，这些都与人体神经、体液调节参与的机体代谢密不可分。 心脏作为人体的“动力”器官，生理情况下，活动、情绪紧张均可使机体代谢增强，心脏做功
有一段时间,我身忙心乱,整个人变得非常浮躁,不知这种状态要持续到什么时候?然而,最烦人的还不是身体上的不适和杂事多,而是家里的电脑坏了,上不了网,打不了字,写不了东西.这
节俭是为人美德，节俭是持家之本、治国之宝，至于节俭还是养生良策的深刻道理，我是最近通过学习罗大经《鹤林玉露》才认识到的。 罗大经，字景纶，号儒林，又号鹤林，南宋吉水人。宝庆二年进士，曾多年为官。罗大经博览群书，学识渊博，著有《易解》十卷及文言轶事小说《鹤林玉露》。 罗大经在《鹤林玉露》中说：“节俭之益非止一端，大凡贪淫之过，未有不生于奢侈者。俭则不贪不淫，是可以养德也。人之受用，自有剂量，省啬
郑红斌教授从事中医药教学与临床多年,长期致力于消化系统疾病的研究,对胆汁反流性胃炎的治疗具有独到心得,临床疗效颇佳.笔者有幸随师临证,感其遣药加减灵活,方简效专,受益