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目的 建立realtime逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测AFPmRNA表达水平方法。方法 提取BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,构建重组质粒 ,建立realtimeRT PCR检测AFPmRNA表达水平方法。结果 重组质粒的阳性克隆效率为 81.8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插入PMD 18T载体内 ,得到realtimeRT PCR动力学曲线。结论 成功建立了realtimeRT PCR定量检测AFPmRNA表达水平方法。