GM-1对人胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞的作用

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目的探索外源性神经节苷脂(GM-1)对人胚胎干细胞(hESC)诱导分化成神经细胞的作用,为临床治疗提供理论依据。方法将人胚胎干细胞(SDU-hESm-1)悬浮培养形成拟胚体(EB),EB再贴壁培养诱导分化神经细胞,分别于悬浮培养EB阶段和EB贴壁培养阶段的神经分化培养基中加入浓度为0、0.5、5、50μg/mL的GM-1,观察EB的形成,计数神经标记性抗原Nestin和β-Tubulin阳性细胞百分率。结果含GM-1的神经分化培养基诱导生成"透亮EB",分化出Nestin和β-Tubulin阳性细胞明显多于不含GM-1培养基诱导出的神经细胞数量,不含GM-1形成的EB发黑;在悬浮培养形成EB开始加GM-1比EB贴壁培养开始加GM-1产生Nestin和β-Tubulin阳性细胞数目更多,但2个加GM-1阶段产生的神经细胞百分率均随GM-1浓度增加而增大。结论首次发现GM-1可以诱导hESC定向分化神经细胞,定向产生神经前体细胞(Nestin阳性),在hESC定向分化神经细胞的过程中,悬浮培养EB阶段加入GM-1更有利于hESC的定向分化。
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