沉默FMOD对H322细胞的增殖和迁移的影响及其作用机制探讨

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiqing1120
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目的 研究纤调蛋白(bromodulin,FMOD)对非小细胞肺癌H322细胞增殖、黏附和迁移的影响,并探讨其作用机制.方法 H322细胞随机分为对照组、小干扰RNA(siRNA)沉默FMOD(FMOD siRNA)组和对照siRNA(ConsiRNA)组.FMOD siRNA和Con siRNA转染H322细胞,CCK-8法检测各组细胞的细胞活性,荧光素双醋酸酯(FDA)荧光染色检测细胞的黏附能力,Transwell法检测细胞的迁移能力;Real time-PCR法检测Con siRNA组和FMOD siRNA组细胞中Cyclin D1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)、FMOD、转化生长因子-β1(TGF-β)、Smad2、Smad3、Smad4及Smad7的mRNA表达,蛋白印迹法检测细胞中Cyclin D1、ICAM-1、E-cadherin、FMOD、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4及Smad7的蛋白表达.结果 与Con siRNA组相比,FMOD siRNA组细胞的细胞活性降低,细胞黏附及迁移能力减弱,差异均有统计学意义(P<0.01),对照组和Con siRNA组差异无统计学意义.Real time-PCR和蛋白印迹法检测结果显示:与Con siRNA组相比,FMOD siRNA组细胞Cyclin D1、ICAM-1、TGF-β1、Smad2、Smad3及Smad4的mRNA和蛋白表达水平降低,E-cadherin及Smad7的mRNA和蛋白表达水平升高.结论 沉默FMOD基因,可抑制H322细胞的增殖、黏附和迁移,其作用可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路实现.
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