宫内移植骨髓间充质干细胞对显性脊柱裂胎鼠神经元重建的作用研究

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hedongxu2288
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目的 胚胎期移植骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cell,BMSCs)至先天性脊柱裂模型胎鼠脊髓中,观察其在显性脊柱裂胎鼠脊髓中存活及分化情况,并探讨其对脊髓神经元修复的治疗潜能.方法 利用胎仔外科和显微注射技术将绿色荧光蛋白(eGFP)转染的BMSCs分别在胚胎第16、17和18天移植到83只脊柱裂和20只正常大鼠胚胎中(group E16、E17and E18),胚胎20 d的胎鼠脊髓被取出并固定.经冰冻切片后,计数eGFP阳性细胞数目,并利用免疫荧光方法检测脊髓中eGFP阳性的BMSCs中神经干细胞(Nestin)、神经元(Neurofilament)和神经胶质细胞(GFAP)的分布与表达.结果 本研究成功的将MSC在宫内移植入胎鼠体内,孕鼠的存活率为94%(81/86),胎鼠的存活率为78.1%(136/174);实验中孕16d的胎鼠存活率为75.8%(91/120)低于孕17 d的80.6%(25/31)和孕18d的87.0%(20/23).计数脊髓中eGFP阳性细胞数,范围在166~735个/根,其中P0代MSCs存活率最低,为10.8%;P3~6代为22.6%、P10~14代为20.1%;P10~14代MSC在母鼠孕16d时移植得到最佳分化率;统计eGFP阳性细胞表达Nestin、Neurofilament和GFAP的阳性率分别为4%~5%、1%~2%和5%~7%.结论 BMSCs移植到显性脊柱裂胎鼠脊髓中能够存活,并在脊髓中表达Nestin、Neurofilament和GFAP,提示移植骨髓间充质干细胞具有向神经干细胞、神经元和神经胶质细胞分化的可能。

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