【摘 要】
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目的 探讨性别决定区Y框蛋白9(sex dtermining regionY-box 9,SOX9)对A549细胞生物学功能影响,并结合生信分析初步讨论其可能的调节机制.方法 通过平板克隆实验、成球实验及Transwell实验观察敲减SOX9对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.通过qRT-PCR及Western blot检测敲减SOX9后A549细胞中SOX2、Nanog、OCT4、Sall4及N-cadherin的mRNA和蛋白表达水平.通过转录组测序并分析敲减SOX9后差异表达基因,并富集相关信
【机 构】
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济宁医学院临床医学院,山东济宁272067;济宁医学院附属医院呼吸与危重症医学一科,山东济宁272029;济宁医学院法医学与医学检验学院,山东济宁272067
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目的 探讨性别决定区Y框蛋白9(sex dtermining regionY-box 9,SOX9)对A549细胞生物学功能影响,并结合生信分析初步讨论其可能的调节机制.方法 通过平板克隆实验、成球实验及Transwell实验观察敲减SOX9对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.通过qRT-PCR及Western blot检测敲减SOX9后A549细胞中SOX2、Nanog、OCT4、Sall4及N-cadherin的mRNA和蛋白表达水平.通过转录组测序并分析敲减SOX9后差异表达基因,并富集相关信号通路.结果 与阴性对照组相比,敲减SOX9组A549细胞的迁移及侵袭细胞数、克隆细胞团数及肿瘤干细胞球数均减少(P＜0.01).同时,敲减SOX9抑制了干性指标SOX2、Nanog、OCT4、Sall4和上皮间质转化相关指标N-cadherin的表达(P＜0.05).通过差异基因的KEGG富集分析差异显著的信号通路为IL-17信号通路、PPAR信号通路、细胞间黏附分子等信号通路.结论 SOX9可能通过IL-17等信号通路影响非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并调控肺癌干性特征.
其他文献
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目的 针对肺结核的早期诊断,采取PCR检验,分析该种检验方式的诊断效果.方法 选取2019年1月-2020年12月本院35例肺结核患者与35例其他肺病但非肺结核患者,均接受PCR检验、结核分枝杆菌培养试验、抗酸杆菌染色试验、RNA恒温扩增实时检验.每一项检验分别采取痰液标本和肺泡灌注液标本.将临床诊断结果作为金标准,对不同检验方式的结果进行分析和对比.结果 2组患者临床症状对比差异无统计学意义(P＞0.05).不同标本下,PCR检验和RNA恒温扩增的阳性率较高,PCR检验的结果真实性最高;同种检验方式下,
目的 尚未发现梅毒螺旋体(TP)对青霉素耐药,但临床上仍存在较高比例的经过青霉素规范治疗后未愈的梅毒血清固定患者.病原菌青霉素结合蛋白的表达水平或结构改变可导致病原菌对抗生素耐受性差异.分析TP的青霉素结合蛋白基因特征,可为揭示该基因在梅毒血清固定现象中的作用机制提供理论基础.方法 使用生物信息学软件诠释TP全基因组ORF,对编码蛋白进行在线分析.结果 梅毒螺旋体亚种Nichols株全基因组序列不含β-内酰胺酶基因,但含有3个编码青霉素结合蛋白mrcA、pbp1、pbp2基因,全长分别为2655 bp、1
目的 探讨PKM2促进ox-LDL刺激的血管平滑肌细胞增殖和糖代谢紊乱的机制.方法 首先观察ApoE-/-小鼠主动脉斑块血管平滑肌细胞PKM2表达.然后以人主动脉血管平滑肌细胞为研究对象,利用MMT法观察PKM2表达对细胞增殖的影响,蛋白质印迹法检测NF-κB p65、pEGFR、活性β-ctaenin、cyclin D1、GLUT1、LDHA蛋白表达,定量PCR法检测PKM2 mRNA表达,免疫共沉淀检测PKM2与EGFR之间相互作用,最后利用分光光度法检测培养基葡萄糖消耗量和乳酸生成量.结果 PKM2
目的 研究浸泡温度和时间对邻苯二甲酸酯类塑化剂从食品包装材料迁移到食品模拟液中的影响.方法 采用双面浸泡法,把塑料包装材料浸泡在模拟液中,改变浸泡温度和时间,用正己烷提取浸泡液,气相色谱串联三重四级杆质谱(GC-MS/MS)法测定,5种内标法进行定量.结果 当浸泡时间相同时,随着温度增加,模拟液中塑化剂的迁移量都有增加,10％乙醇水溶液和3％醋酸水溶液中增加不明显,异辛烷模拟液中迁移量增加最多;当浸泡温度相同时,随着浸泡时间的增长,塑化剂迁移量增加,但不同模拟物中塑化剂的迁移量不同,同种模拟物中不同种类塑
目的 探讨GLi1是否通过调控自噬参与脂多糖诱导的脓毒血症体外模型.方法 体外培养肾小管上皮细胞HK-2细胞系,LPS处理浓度梯度为0μg/ml、10 μg/ml、20 μg/ml、40 μg/ml、80μg/ml,24 h后CCK8测细胞活性,并收集蛋白;时间梯度为40μg/ml的LPS处理细胞Oh、6h、12 h、24 h后CCK8测细胞活性,收集蛋白,进行WB检测相关蛋白表达.用10 μmol/L的GLi1抑制剂GANT61,以及自噬抑制剂3-MA、CQ分别联合40 μg/ml的LPS处理细胞24h
目的 探讨血清AFP水平及其L3异质体(％)联合检测在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染相关原发性肝癌(PLC)中的诊断价值.方法 收集2018年1月-2020年12月杭州市西溪医院收治的386例HBV慢性感染者的性别、年龄等基本信息,其中PLC 195例,肝硬化(LC)92例,慢性乙型肝炎(CHB) 99例.男性304例,女性82例,平均年龄为(51.1±12.3)岁.测定其血清中AFP含量及AFP-L3含量.应用多因素Logistic回归分析建立用于诊断PLC的函数模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线评
目的 调查湖州市城郊鼠形动物分布,分析鼠形动物汉坦病毒感染状况.方法 2020年9月-11月在湖州郊区捕获鼠形动物,采集肺组织提取核酸,应用实时荧光定量PCR方法检测汉坦病毒病原体.结果 共捕获鼠形动物105只,共检出阳性动物11只,感染率为10.48％.不同生境鼠形动物的汉坦病毒感染率差异无统计学意义(P=0.052),重点行业鼠形动物汉坦病毒阳性率为30.77％ (4/13),城镇居民区为11.11％ (1/9),农田耕地为8.82％(6/68),农村居民区未检出汉坦病毒.105只鼠形动物中黑线姬鼠3
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