载体介导的RNAi技术对HL-60细胞hTERT基因、蛋白表达和细胞增殖的影响

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目的:探讨载体介导的靶向人端粒酶反转录酶(htert)基因 rna 干扰(rnai)对白血病 Hl-6细胞 htert 基因、蛋白表达和细胞增殖的影响。方法采用靶向 htert 基因 rnai 的重组质粒 psilecer1.0-U6/htert 转染 Hl-60细胞,以空载体质粒 psilecer1.0-U6转染组、转染试剂及空白组作对照,将转染后24h、72h、120h 的细胞用 rt-Pcr 检测细胞 htert 基因 mrna 的表达,Western-blot 检测细胞 htert 蛋白的表达,Mtt 检测细胞增殖活性。结果转染psilecer1.0-U6/htert 质粒24h、72h 和120h 后,Hl-60细胞 htert 基因、蛋白表达水平均低于各对照组(p <0.05),细胞增殖抑制率高于各对照组(p <0.05)。htert 基因、蛋白和细胞增殖抑制率在转染 psilecer1.0-U6/htert 质粒24h、72h 和120h 组间无明显差异(p >0.05),在3个对照组间也无明显差异(p >0.05)。结论载体介导的靶向htert 基因的 rnai 技术能在体外抑制 Hl-60细胞 htert 基因和蛋白的表达,增加细胞凋亡,抑制增殖。
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