【摘 要】
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目的克隆、筛选人抗乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）,并对其基因序列进行分析。方法从抗-HBs抗体阳性血液中分离淋巴细胞,提取总RNA,合成cDNA,以此为模板,PCR扩增轻链和重链抗体
【机 构】
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吉林大学药学院,吉林省肝胆病医院五疗区
【基金项目】
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吉林省再生医学重点实验室资助项目（200507）
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目的克隆、筛选人抗乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）,并对其基因序列进行分析。方法从抗-HBs抗体阳性血液中分离淋巴细胞,提取总RNA,合成cDNA,以此为模板,PCR扩增轻链和重链抗体可变区基因;应用已构建的抗体支架载体,构建重组表达载体,转化毕赤酵母X33,建立相应的酵母表达文库;甲醇诱导表达,Westernblot及ELISA筛选抗-HBs抗体阳性菌株;PCR扩增DNA片段,进行测序及Blastn比对,并与已发表的抗-HBs抗体序列进行同源性分析。结果重链及轻链抗体重组表达载体经双酶切鉴定,证明构建
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