转录因子E2F启动子的克隆及其肿瘤靶向特异性的鉴定

来源 :临床肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tom95800

【摘要】

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目的：克隆转录因子E2F的启动子，研究其针对pRb／E2F／p16调控环路缺陷肿瘤的特异性。方法：提取HepG-Ⅱ细胞基因组DNA，PCR扩增其转录因子E2F启动子（E2Fp），插入pGL3-Basic多克隆位点，构建成

【作者】

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马炬明苏长青王伟国施建国胡慧珍李林芳钱其军

【机构】

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解放军第117医院内科,上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室

【出处】

：

临床肿瘤学杂志

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

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转录因子启动子基因治疗报告基因 Transcriptional factor Promoter Gene therapy Reporter gene

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（30572149）,浙江省科技计划项目（2006C30021）

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目的：克隆转录因子E2F的启动子，研究其针对pRb／E2F／p16调控环路缺陷肿瘤的特异性。方法：提取HepG-Ⅱ细胞基因组DNA，PCR扩增其转录因子E2F启动子（E2Fp），插入pGL3-Basic多克隆位点，构建成pGL3-E2Fp；采用Luciferase报告基因检测方法，在肿瘤细胞和正常细胞内测定E2Fp介导的Luciferase表达，以推测E2Fp肿瘤的特异性。结果：E2Fp在正常细胞内几乎没有活性，而在肿瘤细胞内具有较高的活性，两组间Lucfferase报告基因表达的差异有显著性（P=0．0

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