【摘 要】
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目的研究elavl1/HuR对斑马鱼肠神经系统早期发育的影响。方法应用免疫组化方法检测elavl1、HuC/HuD在野生型斑马鱼肠道的表达。挑选25个斑马鱼胚胎，应用Western Blot法检测elavl1在受精后24～96 h野生型斑马鱼中的蛋白表达水平。在野生型斑马鱼胚胎处于1细胞期时分别显微注射4 ng、8 ng elavl1a morpholino和8 ng control morpho
【机 构】
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温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院 小儿外科 325000,温州医科大学附属第一医院小儿外科 325000,温州医科大学附属康宁医院精神卫生研究所 325000,温州医科大学附属康宁医院精神卫生研
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目的研究elavl1/HuR对斑马鱼肠神经系统早期发育的影响。
方法应用免疫组化方法检测elavl1、HuC/HuD在野生型斑马鱼肠道的表达。挑选25个斑马鱼胚胎，应用Western Blot法检测elavl1在受精后24～96 h野生型斑马鱼中的蛋白表达水平。在野生型斑马鱼胚胎处于1细胞期时分别显微注射4 ng、8 ng elavl1a morpholino和8 ng control morpholino，挑选25个受精后24 h的胚胎采用Western Blot法检测elavl1的蛋白表达，免疫组化检测受精后72 h、96 h的胚胎斑马鱼肠道神经元的分布情况。
结果elavl1在斑马鱼全身都有表达，而HuC/HuD在第四天斑马鱼肠道部位出现表达；在受精后24～96 h时期，elavl1在斑马鱼中的蛋白表达量随斑马鱼生长而增加，且受精后96 h时elavl1蛋白量明显高于受精后24 h、48 h、72 h，差异有统计学意义(P<0.05)；分别注射4 ng、8 ng elavl1a Mo和8 ng Con Mo后，发现注射8 ng Con Mo组elavl1蛋白含量高于其他两组，且差异有统计学意义(P<0.05)；敲降elavl1a后免疫组化显示在受精后72 h时三组都不能在肠道末端明显观察到神经元，受精后96 h时可以观察到elavl1a Mo 8 ng组和elavl1a Mo 4 ng组较Con Mo 8 ng组斑马鱼肠神经元数量有所减少，每组随机抽取5条斑马鱼统计肠道末端到前面四个体节长度的肠道神经元数量，发现elavl1a Mo 8 ng组和elavl1a Mo 4 ng组较Con Mo 8 ng组斑马鱼肠神经元数量差异有统计学意义(P<0.05)。
结论elavl1a是斑马鱼肠神经发育过程中重要基因，敲降elavl1a会减少肠神经元细胞数量。
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