猪星状病毒nsP1a/4蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiaofei888
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了获得猪星状病毒(Porcine astrovirus, PAstV)重组蛋白nsP1a/4和多克隆抗体nsP1a/4,试验采用PCR技术扩增得到nsP1a/4基因片段,通过双酶切技术鉴定重组表达质粒nsP1a/4-pET-32a。利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞表达重组蛋白nsP1a/4,通过SDS-PAGE鉴定重组蛋白nsP1a/4表达情况及可溶性。利用Ni-Agarose Resin纯化重组蛋白nsP1a/4,再通过Western-bolt验证。以纯化的重组蛋白nsP1a/4免疫健康新西兰大白兔制备多克隆抗体nsP1a/4,通过Western-bolt检验多克隆抗体nsP1a/4的特异性。结果表明:试验扩增出nsP1a/4基因片段,成功构建出重组表达质粒nsP1a/4-pET-32a,重组蛋白nsP1a/4以包涵体形式在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中大量表达。经Ni-Agarose Resin纯化的重组蛋白nsP1a/4单一,Western-bolt成功鉴定到重组蛋白nsP1a/4,多克隆抗体nsP1a/4能与重组蛋白nsP1a/4发生特异性结合。说明试验成功制备出PAstV的多克隆抗体nsP1a-4。
其他文献
幼儿美术教学中,教师要转变以往单纯的模仿、技能训练的传统式观念,从儿童的年龄特征出发,引导幼儿多观察、多欣赏,逐渐提升其审美能力;透过各种途径,了解儿童的创作意向,调动其绘画兴趣,给予孩子心中所想的画以灵活的引导,通过对当前存在的问题进行剖析,提出几点具有建设性的见解,借多种策略营造氛围、与自身生活相连、学会发现美,变艺术活动素材等,以期为美术教学的生活化提供一定的参考,进而促进儿童的绘画艺术。
本文分析了冬季项目运动员下肢运动损伤影像诊断类型及对重返赛场比率的影响。收集357例冬季项目运动员下肢运动损伤患者的临床资料,分析患者一般资料、损伤原因、损伤部位、影像学检查诊断损伤类型。结果显示:损伤原因以动作技术失误(49.86%)、冲撞和激烈对抗(19.05%)、疲劳(17.09%)为主;损伤部位以膝关节(53.78%)、踝关节(31.93%)为主;损伤类型以韧带损伤(40.62%)、骨折(
为进一步完善当前水上交通事故调查处理程序,使其满足实际工作需要,提出内河水上交通事故调查处理程序研究。先分析现行的调查处理程序,总结事故调查处理程序所依靠的法律依据。然后分析当前程序存在的问题,如未充分体现民主性、程序自身可操作性不强、海事行政处罚体制存在限制。最后根据其存在问题提出完善及修改相关法律规范、规范事故海事行政处罚行为、取消程序仅适用水上交通小事故的限制等三个事故调查处理程序优化措施,
融媒体时代,有声传播样态打破了时间空间的限制,以其独特的优势迅速崛起,激发出无限的传播潜能,也为历史文化遗产的传播提供了新机遇。本文从现阶段馆藏文物传播的现状和困境入手,分析“声音”与“文物”的碰撞与融合,并提出一些传播路径。
适值国家鼓励保护城市文化特色、弘扬城市文化之际,文章选取国内部分城市品牌形象建设案例,结合皮尔斯的符号学理论,探析城市文化特征转译为视觉因素的依据。总结在文化特征背景下城市品牌形象构建的成功经验。以此为据,提出普适的方法论,为城市品牌形象中文化特征的构建提供参考。
目的分析职业健康体检人群中幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,HP)的感染状况,探讨胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及PGⅠ与PGⅡ的比值(PGⅠ/PGⅡ)与幽门螺旋杆菌感染之间的关系。方法收集某公司2018年进行职业健康体检且行幽门螺旋杆菌检测的970名员工体检资料,根据HP检测结果,将员工分为HP阳性组和HP阴性组,分析两组PGⅠ和PGⅡ与HP感染之间的关系。结
随着经济社会的发展,绿色建筑已经进入更加广泛、高质量发展阶段。基于GB/T50378—2019《绿色建筑评价标准》(以下简称“新国标”),以福建地区为例,充分考虑福建地区的地理位置、气候环境、资源分布、经济发展状况以及人文环境等,结合“3060双碳目标”实现,就福建地区的绿色建筑设计和评价的本土化地域化特点进行探讨,提出在新阶段背景下绿色建筑本土化设计和评价建议。通过对福建省已经竣工的25个绿色建
在基于双目视觉的三维轨迹测量中,双目同名点的高精度匹配是提高测量精度的关键。在狭长空间的近距离测量场景下,针对双目拍摄角度不同导致仅用形心法定位匹配的轨迹测量精度不高的问题,研制了一种形心匹配优化下的狭长空间近距离轨迹测量系统。首先,在仅用形心法对目标物体定位匹配的基础上利用极线约束投影进行双目形心的二次定位。接着,提出了一种基于距离和方法权重的灰度互相关方法进行双目形心的亚像素匹配。最后,通过卡