【摘 要】
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目的:在多克隆抗体的基础上研制1种用于检测牛奶、蜂蜜中链霉素残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法:以兔抗链霉素多抗为包被原,以链霉素-辣根过氧化物连接物为
【机 构】
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中国计量学院生命科学学院; 浙江省生物计量与检验检疫重点实验室; 杭州迪恩科技有限公司;
【基金项目】
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浙江省重大科技专项(2006C12102);杭州市重大科技创新专项(20083212A25);浙江省重点科技创新团队项目(2010R50028);浙江省自然科学基金项目(LY13C200009)
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目的:在多克隆抗体的基础上研制1种用于检测牛奶、蜂蜜中链霉素残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法:以兔抗链霉素多抗为包被原,以链霉素-辣根过氧化物连接物为标记物,TMB为显色底物,建立了1种链霉素残留量检测的竞争性直接酶联免疫快速检测方法,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证。结果:用该检测方法分别检测牛奶、蜂蜜中的链霉素残留情况。结果表明,在0.5~40.5 ng/mL的浓度范围内标准曲线方程为y=-0.4341x+1.1786(r=0.9708),半抑制率IC50为3.60 ng/mL,最低检测限IC10为0.43 ng/mL,平均批内与批间变异系数分别为5.78%与8.11%。在牛奶、蜂蜜样品中的检测限分别为2.7 ng/mL、2.8 ng/mL。在添加10.0~400.0 ng/mL范围内,平均回收率在97%~107%。除双氢链霉素外,与其他抗生素药物均无交叉反应。牛奶、蜂蜜样品采用ELISA和HPLC 2种检测方法的相关系数分别为0.99和0.97,说明本研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有很好的相符性。结论:直接竞争ELISA法可以满足牛奶、蜂蜜中链霉素残留的检测要求。
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