目的探讨理想的海洋细菌增菌、分离与鉴定方法。方法海洋细菌经8种不同种类增菌液增菌后,选择11种不同种类的培养基进行分传,然后挑选单个菌落应用VITEK全自动微生物鉴定仪(VITEK-AMS)、API微生物鉴定系统和BIOMIC检测仪进行检测,用微量生化反应管进行手工补充鉴定。结果从中国四大海域采集的海水中共分离到72种411株细菌与真菌。弧菌为海水中的优势菌(177株,43.1%)。弧菌应首选碱性蛋白胨水和嗜盐菌增菌液进行增菌,然后用TCBS平板和血平板进行分传。其他细菌适合用2号营养肉汤增菌后再用血平板和中国蓝平板分离。真菌适合用真菌肉汤液增菌,用沙氏平板进行分传。对所分离的细菌采用VITEK-AMS、API系统和BIOMIC检测仪结合微量生化反应管进行手工补充鉴定,获得了良好的分离效果。结论对于海洋中不同种类的细菌与真菌,应选用不同种类的增菌液和培养基进行增菌与分离。采用VITEK-AMS、API系统、BIOMIC检测仪结合微量生化反应管进行手工补充鉴定,是较理想的海洋细菌检测方法。