【摘 要】
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目的：通过原核细胞表达和纯化9R-GFP-PHD重组蛋白，并利用纯化后的9R-GFP-PHD蛋白来检测与磷脂酰肌醇4，5-二磷酸（PIP2）和 IP3的结合能力以及细胞膜上 PIP2的动态变化。方法通过分子
【机 构】
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南昌大学转化医学研究院,南昌大学第二附属医院感染管理科
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目的：通过原核细胞表达和纯化9R-GFP-PHD重组蛋白，并利用纯化后的9R-GFP-PHD蛋白来检测与磷脂酰肌醇4，5-二磷酸（PIP2）和 IP3的结合能力以及细胞膜上 PIP2的动态变化。方法通过分子克隆技术将磷脂酶 C-δ1的普列克同源域（PHD）、荧光蛋白 GFP及细胞穿膜多肽9R融合以构建相应蛋白表达载体。利用原核表达体系 BL21大肠埃希菌和镍柱进行重组蛋白的表达和纯化，其中 GFP和9R-GFP为9R-GFP-PHD的对照蛋白。获取重组蛋白后，通过同位素实验和液体闪烁计数器，分别检测和比较
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